ELISA实验常见样本类型处理


1. 细胞培养上清 
①收取细胞上清;
②离心10min(4℃,3000g),取上清。建议进行两次离心和取上清; 
③建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存


2.血清 

①不含抗凝剂的采血管采血,室温静置2小时(避免震动,防止溶血); 
②离心20min(4℃,3000g),取上清。建议进行两次离心和取上清;
③建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存


3.血浆 

①含抗凝剂(EDTA、肝素,具体采取哪种抗凝剂,参考说明书)的采血管采血; 
②离心20min(4℃,3000g),取上清。建议进行两次离心和取上清; 
③建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存


4.细胞裂解液

①收集细胞,PBS清洗后,离心10min(1000g,4℃),弃去上清; 
②加入适量裂解液(107细胞对应200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min); 
③离心10min(13000rpm,4℃),取上清,建议进行两次离心和取上清; 
④测定BCA总蛋白浓度; 
⑤建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存


5.组织裂解液

①适量裂解液加入组织中(10mg对应100-200ul裂解液); 
②组织破碎器处理组织至匀浆(冰上处理,放置于4℃冰箱(20min));
③离心10min(13000rpm,4℃),取上清,建议进行两次离心和取上清; 
④测定BCA总蛋白浓度; 
⑤建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存


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