资料摘要
资料下载细胞培养技术中，细胞计数是一项基本功，对于标准化培养条件以及需要定量的实验来说都关键。这里介绍使用血细胞计数器对细胞进行计数的经典方法以及中间一些需要注意的细节。 制备细胞悬液： 对于贴壁生长的细胞，我们需要使用胰酶消化的方法使细胞从培养皿表面脱落 根据需要加入合适体积的培养基，将细胞进行中和及稀释，以得到均质的细胞悬液。要求尽可能将细胞吹打散开，不要残留任何细胞团 准备血细胞计数器： 使用70%乙醇将盖玻片和血细胞计数器清洁干净 将将盖玻片润湿（使用水或呼一口气，目的是使盖玻片与血细胞计数器接触更紧密，易于粘连），并覆盖至血细胞计数器上 台盼兰染色（可选）： 如果需要计算细胞的活力，则需要将细胞悬液和0.4%台盼兰等体积混合 室温孵育3-5分钟，使台盼兰进入死细胞，使死细胞着蓝色 血细胞计数器加样： 使用吸管将细胞悬液或细胞/台盼兰混合液滴加到血细胞计数器计数池的边缘。此时液滴将在虹吸的作用下进入盖玻片下方的计数池 以同样的方式在另一侧的计数池中也加入细胞悬液 将计数板放置几分钟使细胞扩散，同时用吸水纸吸除多余的液体 细胞计数：
文献贡献者
细胞计数器的原理2
简介：在100倍显微镜下，移动计数板将视野对准计数板的中央大方块，该方块四周有一圈3条平行线包围，中间有密集的网格。中央方块区差不多刚好可以填满整个视野 使用手持式计数器记录计数池四个角以及中央方块内的细胞数（1-5号位置，经典的current-protocol推荐每个方块细胞数应不大于20-50），并重复记录另一侧计数池中的细胞数，总计十个方块。计数的方法是只计算上边和左边压线的细胞，而右边和下边压线的细胞不予计算（下图，总体原则是“计上不计下，计左不计右"，判断标准为是否接触三条边线的中间线）。如果有多个细胞没有吹散成团存在，此时只可记为一个细胞。如果团块很多，则可能需要重新吹打甚至消化直至绝大多数细胞为单个细胞
血液融浆机的操作规程和原理2
简介：6、解冻完成后，依次将血浆解冻袋取出，将血浆去掉解冻袋后放置室温下待用； 7、如果解冻后的血浆温度已经恢复到室温仍未发出，应该将血浆转移到4℃储血冰箱内待用。 八、注意事项 1、解冻箱应使用独立的三芯插座； 2、解冻箱上水时务必连接好排水管，防止加水过量后溢水。 3、发现有破损血浆时需立即换水，并进行清洗。 4、要避免血袋标签等物品落入水箱内，以免堵塞水管，致使水循环系统瘫痪； 5、解冻箱长期不用时，应将解冻箱内的水排尽。 九、保养与维护 1、解冻箱应每周做清洗保养，清洗内外表面； 2、温度校正：每年由计量部门对解冻箱进行温度检测，如发现实测温度与显示温度相差0.5℃以上，应对解冻箱进行校正。
血液融浆机的操作规程和原理1
简介：操作规程 一．目的 建立循环水浴箱解冻新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆及冷沉淀标准操作规程,规范冰冻血液成分解冻操作流程,血液质量安全。 二． 职责 本科室工作人员应用此操作规程,为临床提供安全的血浆。 三．原理 冰冻血浆融化箱采用电气控制原理,新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆及冷沉淀等需要在 37 一 40℃稳定温度条件下，解冻防止蛋白成分析出 ,循环水溶箱可以维持稳定温度的水浴条件，快速、批量解冻冰冻血液制品，解冻速度和血液质量。 四．适用范围 适用于循环水浴箱解冻新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆及冷沉淀操作。 五、器材与试剂 器材：血库融浆机，血浆解冻袋 六、环境条件 温度：20-27℃，湿度≤80% 七、操作程序： 1、连接进水管，排水管，接通电源； 2、打开电源开关，按“启动"键，提示“缺水"状态，拧开水龙头开始加水，直至进水完成，“预温"灯亮； 3、设定解冻温度（一般设定为38℃）及解冻时间（根据解冻血浆数量确定，一般设定在16分钟以上）； 4、待预温完成后，水箱水位上升到工作状态； 5、将血浆或冷沉淀从低温冰箱中取出，去掉包装盒，套上解冻袋，放入解冻槽中，盖好解冻箱盖；
细胞分类计数器使用方法
简介：1、 仪器接通电源，打开电源开关，十组数据和总数都显示“0"，若有显示不为“0"，则按一下“复位"键，使各组显示数据清零。 2、 仪器把常用的“中性分叶核、中性杆状核、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、中性晚幼粒、变异淋巴、幼稚细胞"九种血细胞计数对应在九个计数键上，若进行上述九种血细胞计数，可直接按动相应的计数键进行计数。 3、 仪器没有定义的其它血细胞的分类计数，用户可在第“- -"组计数器上自行定义，按动相应的计数键进行计数。固相萃取真空装置 4、 十只计数键中按动其中任一只键，都会听到蜂鸣器的“嘟"声，表示计数有效，相应的计数器加“1"，而Σ总数同时加“1"。若计数时没有听到蜂鸣器的“嘟"声，则表示该次计数无效，需重新计数。 5、 当计数的总数达到“100"，则本次分类计数已计满，可听到“嘟"的长声，请记下各组数据。按一下“复位"键，显示屏全部清零，可继续计数。（单路计满时，总数显示“100"，单路显示“FF"。） 6、 如果计数的总数没有计满“100"，而需结束本次测量时，可按一下“%"键，在听到“嘟"声后，电脑自动将各组数据换算成百分比值显示在对应的显示屏上。
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