使用非均匀电场力提高单分子阵列检测IL-2、IL-6、IL-10和TNF-α的灵敏度

2021/10/08   下载量: 3

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应用领域 医疗/卫生
检测样本 全血/血清/血浆
检测项目 遗传
参考标准 数字ELISA

多重单分子阵列技术平台(数字 ELISA) 是作为一种具有独特优势的新平台,可用于检测样品中的多种单分子。如何提高检测的灵敏度是当前相关研究的方向。在这里,我们报告了一种免疫测定方法,该方法应用电动效应来分离单个编码的珠子并限制在微孔中,以同时提高细胞因子检测的效率。微流体设计提供了非均匀电场以诱导介电泳 (DEP) 力并操纵珠子。两种波长的激发光激发编码的珠子,用于同时检测。光通过全内反射原理被限制在底部幻灯片上。通过从图像中拾取每个珠子,然后对报告分子发出的荧光强度进行积分,获得捕获的细胞因子的浓度。结果表明,编码珠的填充百分比通过 DEP 效应从 10-20% 提高到 60-80%。通过比较颗粒、自身及其表面的荧光颜色,将四种靶细胞因子IL-2、IL-6、IL-10和TNF-α的浓度计算为pg/ml水平。加标和回收实验验证了效率,超过 70% 的目标分子被捕获。我们的方法的可靠性也通过流式细胞术验证。综上所述,我们认为 DEP 的应用可以提高数字 ELISA 对多重快速检测的灵敏度。

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多重单分子阵列技术平台(数字 ELISA) 是作为一种具有独特优势的新平台,可用于检测样品中的多种单分子。如何提高检测的灵敏度是当前相关研究的方向。在这里,我们报告了一种免疫测定方法,该方法应用电动效应来分离单个编码的珠子并限制在微孔中,以同时提高细胞因子检测的效率。微流体设计提供了非均匀电场以诱导介电泳 (DEP) 力并操纵珠子。两种波长的激发光激发编码的珠子,用于同时检测。光通过全内反射原理被限制在底部幻灯片上。通过从图像中拾取每个珠子,然后对报告分子发出的荧光强度进行积分,获得捕获的细胞因子的浓度。结果表明,编码珠的填充百分比通过 DEP 效应从 10-20% 提高到 60-80%。通过比较颗粒、自身及其表面的荧光颜色,将四种靶细胞因子IL-2、IL-6、IL-10和TNF-α的浓度计算为pg/ml水平。加标和回收实验验证了效率,超过 70% 的目标分子被捕获。我们的方法的可靠性也通过流式细胞术验证。综上所述,我们认为 DEP 的应用可以提高数字 ELISA 对多重快速检测的灵敏度。

Dielectrophoresis assisted high-throughput detection system for multiplexed immunoassays.png

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