压力蒸汽灭菌生物指示剂

生物指示剂分类：

　　1.根据结构，可分为片状生物指标和独立生物指标；薄片状生物指标需要使用阳性和阴性对照，而独立的生物指标只需是阳性即可。

　　2.根据ISO11138-1（2006）的分类，当前的生物指标包括环氧乙烷灭菌的生物指标，湿热灭菌的生物指标，干热灭菌的生物指标以及过氧化氢低温等离子体灭菌的生物指标和甲醛杀菌的生物指示剂。

　　3.根据栽培时间可分为一般生物指标和快速生物指标。通用的生物指示剂是基于在孢子复苏后由指示剂种类的代谢引起的培养液的pH值变化，并且酸碱指示剂改变颜色以进行解释。时间通常超过24或48小时；而快速的生物指示剂是基于孢子复苏。酶促反应通过荧光来解释，时间通常为3-4小时。同时，国外正在开发更快速的生物指示剂，预期结果将在一小时内获得。

　生物指示剂的基本信息

　　1.生物指示剂是一种特殊的活微生物产品，可用于确认灭菌设备的性能，验证灭菌程序并监控生产过程中的灭菌效果。

　　2.生物指示剂的定义：它对特定的灭菌处理具有一定的抵抗力，并装在用作细菌载体的内包装中。用于确认灭菌设备的性能，验证灭菌程序以及监视生产过程的灭菌效果。

　　3.生物指示剂的分类：1）根据结构，可分为片状生物指示剂 和自足生物指示剂（self-）；薄片状生物指标需要使用阳性和阴性对照，而包含生物指标的只需使用阳性对照。

灭菌生物指示剂原理

　　1.湿热灭菌：湿热灭菌最常用的生物指示剂是嗜热脂肪芽孢杆菌的孢子，例如NCTC10007，NCIMB8157，ATCC7953。D值为1.5-3.0min，每片（或每瓶）的活孢子数为5 * 10（5）-5 * 10（6），应在121℃下完全杀死19min。另外，也可以使用梭状芽孢杆菌的孢子，例如NCTC8594，NCIMB8053，ATCC7955，其D值为0.4-0.8分钟。

　　2.干热灭菌：干热灭菌最常用的生物指示剂是枯草芽孢杆菌孢子，例如NCIMB8058和ATCC9372。D值大于1.5分钟，每块活孢子数为5 * 10（5）-5 * 10（6）。大肠杆菌内毒素用于验证去热原，其添加量不少于1000个细菌内毒素单位。

　　3.辐射灭菌：辐射灭菌中最常用的生物指示剂是短小芽孢杆菌的孢子，例如NCTC10327，NCIM10692，ATCC27142。每块活孢子的数量为10（5）-* 10（6），当辐射剂量为25kGy时，D值约为3 kGy。但是，应该指出的是，灭菌产品中所含的微生物可能比短小芽孢杆菌孢子具有更强的辐射抗性。因此，短小芽孢杆菌孢子可用于监测灭菌过程，但不能用于确定灭菌辐射剂量。

　　4.气体消毒；环氧乙烷灭菌最常用的生物指示剂是枯草芽孢杆菌孢子，例如NCTC10073，ATCC9372。气态过氧化氢灭菌最常用的生物指示剂是嗜热脂肪芽孢杆菌的孢子，例如NCTC10007，NCIM8157，ATCC7953。每块活孢子的数量为1 * 10（5）-5 * 10（6）。在环氧乙烷灭菌中，枯草芽孢杆菌孢子的D值大于2.5分钟，环氧乙烷浓度为600 mg / l，相对湿度为60％，温度为54℃消毒。

生物指示剂的基础知识

　　1.生物指示剂的概念：根据ISO11138：

　　2.生物指示剂：一种含有活微生物并对特定灭菌处理具有一定抵抗力的测试系统；

　　3. DValueD值：在设定条件下灭活90％的测试细菌所需的时间；

　　4.过程验证装置：具有预定的对灭菌过程的抵抗力的模拟装置，用于评估灭菌过程的有效性；

　　5.孢子总数：生产者校准的微生物数量；

　　6.电阻计：一种特殊的设备，可以在有限条件下的灭菌过程中产生物理/化学变化的组合，以测量生物指标的电阻；

　　7. ZValueZ值：导致D值减少或增加10倍的温度变化值；

　　8.（SAL）无菌保护等级：对灭菌物品

　　菌株选择和培养条件

　　1.压力蒸汽灭菌生物指示剂：指示菌通常为嗜热脂肪芽孢杆菌（ATCC7953），培养温度为56℃；

　　2.环氧乙烷灭菌的生物指示剂：指示菌通常为枯草芽孢杆菌黑色变体孢子（ATCC9372），培养温度为37℃；

　　3.干热灭菌生物指示剂：指示菌通常是枯草芽孢杆菌黑变种。孢子（ATCC9372），培养温度为37℃；

　　4.过氧化氢血浆灭菌的生物指示剂：指示菌通常为嗜热链球菌的孢子（ATCC7953），培养温度为56℃；