供货周期: | 7天 |
品牌: | 博尔森 |
型号: | 500T |
货号: | BES21076BO |
产品概述
双缩脲是一种用于分析蛋白质的方法,双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下,肽键与铜离子结合,生成蓝紫色的化合物,此化合物在540nm的吸光度与肽键的数量呈正比例关系,因此可计算出蛋白质的含量。 双缩脲法测蛋白浓度兼容性亦很好,不受大部分样本中其他成分的影响,但易受铜离子螯合剂的影响。另外,对于血清总蛋白的双缩脲分析,胆红素、脂类、血红蛋白、葡聚糖具有一定干扰作用。 双缩脲法在5~160mg/ml浓度范围内有较好的线性关系。 本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.试剂拆封后请尽快使用完!
2.蛋白标准配制成溶液后要-20℃保存。
有效期
一年
检测方法
酶标仪或分光光度计
适用样本
蛋白样本
产品应用
蛋白定量
仪器准备
1.酶标仪或分光光度计
2.移液器
3.冰箱
4.冰盒
试剂准备
1.纯水 2.生理盐水
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.96孔板
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后,即获得蛋白标准原液;该原液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准原液-20℃长期保存;
3.待测蛋白和蛋白标准加入双缩脲试剂A 后,如果发现检测效果不佳,可以室温放置1h或60℃放置15min,颜色会随着时间的延长而不断加深;
4.测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加,吸光度或颜色没有明显变化,可能的原因是样品中含有铜离子螯合剂;
5.蛋白浓度低于20mg/ml时,颜色反应呈不明显的蓝色;当大于40mg/ml时,即可呈现明显的蓝紫色反应;
6.本试剂盒的线性范围是5~160mg/ml,样品蛋白浓度应大于1mg/ml,以20mg/ml上为宜;如果需测定低浓度蛋白样品(1mg/ml),请选择BCA蛋白定量试剂盒(BB-3401);
7.本产品反应生成的蓝紫色的化合物的吸光度,与试剂批次、pH值、反应温度有关;因此建议,每次测定都做标准对照;
8.氨基酸和二肽不发生双缩脲反应,三肽、寡肽和多肽与铜离子的双缩脲复合物,呈粉红色-紫红色,与蛋白质的双缩脲反应结果不同;
9.如果没有酶标仪,也可以使用分光光度计测定。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量会显著减少;
10.检测中发现所有孔都呈暗紫色,可能原因是样品中含有还原剂,应适当透析或稀释样品。
使用方法
1. 取0.25ml蛋白标准配制液C或稀释液加入到40mg的蛋白标准B中,充分溶解后配制成蛋白标准溶液(160mg/ml),配制后可立即使用;溶解后的蛋白标准应-20℃保存。也可根据需要进行稀释,如稀释至40mg/ml;
2. 将标准品按0,1,2,4,8,12,16,20ul加到96孔板的标准孔,加稀释液补足至20ul;
3. 加适当体积待测蛋白样本到96孔板的样品孔中。
4. 各孔中加入200ul双缩脲试剂A,室温静置10~15min;
5. 测定540nm波长处的吸光值,如无540nm,510~562nm之间的波长也可;
6. 根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度;
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
GelstainRedTM 核酸染料, 10,000× in water
Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water
彩色预染蛋白Marker(10-250kDa, 双色)
琼脂糖 A2015
Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)
PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒(10%)
Minerva Super Fusion Cloning Kit(无缝克隆试剂盒)
Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖检测试剂盒
彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
二安替比林甲烷
焦硫酸钾
偶氮甲碱H
硫酸钾
阿拉伯胶
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