实验室要求
对样本检测的人员要受过相关技术和安全操作培训。标本的检测需要BSL-2或同等级别的设施。若要培养病毒,实验室等级至少需要BSL-3级别设施。
样本要求
上呼吸道标本:鼻咽或口咽拭子或冲洗·
下呼吸道标本:较严重呼吸道疾病患者的痰液、气管内吸出或支气管肺泡灌洗液。
除此之外,还可以用血液以及粪便等。
样本搜集和储存的条件
检测的标本应在采集后要尽快送到达实验室。可以及时送到实验室的样品可以在2—8°C下储存和运输。当标本可能延迟送达实验室时,强烈建议使用运输病毒的介质。样品可以冷冻到-20°C或理想情况下是-70°C,如果预计会进一步延迟,可以用干冰装运(见下表)。重要的是要避免标本的反复冷冻和解冻。
样本预处理
在接收到样本后,RNA提取应在BSL-2或同等设施的生物安全柜中进行。RNA提取前对样品不能进行热处理。未灭活的样本对于检测工作人员以及实验室安全性防护有着极大的挑战。WHO对于有传染性样本进行下游PCR检测前,建议采用灭活后的样本。针对有传染性的样本,罗氏的方案支持先进行裂解灭活,再进行手动或全自动核酸提取。
MagNA Pure 96
全自动核酸纯化仪
MagNA Pure 24
全自动核酸纯化仪
MagNA Pure LC2.0
全自动核酸纯化仪
(仅供研究,不用于临床诊断)
High Pure Viral RNA Kit
(手动提取试剂盒)
(100次反应/盒,仅供研究,不用于临床诊断)
▲点击查看大图
样本检测
Covid-19病毒的常规确认是通过核酸扩增试验检测病毒RNA的独特序列,如实时逆转录聚合酶链反应(rRT-PCR),必要时通过核酸测序进行确认。罗氏诊断与德国TIB Molbiol 公司最新联合推出的LightMix® Modular 2019新型冠状病毒检测试剂盒,基于罗氏诊断LightCycler系列实时荧光PCR平台研发,该系列试剂盒通过检测E基因,Orf1ab片段中的RdRp基因,以及N基因,可快速确认是否为2019新型冠状病毒感染。这三个基因位点的检测,同时符合世界卫生组织与国家CDC的要求。
LightCycler 480实时荧光定量PCR仪
2019 新型冠状病毒检测结果
▲点击查看大图
* 数据出自WHO官网列明的操作手册《Diagnostic detection of 2019-nCoV by real-time RT-PCR》
*试剂盒可适配机型包括但不限于:LightCycler 480 II, LightCycler 96, LightCycler 2.0, LightCycler Nano
* LightMix® Modular 2019新型冠状病毒检测试剂盒,仅用于科学研究,不可用于临床诊断
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为了能够更快响应一线单位的检测需求,罗氏诊断的全自动分子检测设备平台,也可同时兼容由国家卫健委认可的多家新型冠状病毒检测试剂盒品牌,在保证方案完整性的同时,也提供足够的灵活性。
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