VIPS PRO + MatriClone，助力 iPSC 高效工艺流程！

此外，使用 MatriClone（一种可溶性基质胶）结合 VIPS PRO 进行铺板，有效提高单克隆铺板及恢复率，助力 iPSC 的高效工作流程。

人类诱导多能干细胞株 (STBCi044-B) 在 Corning^® TC 处理的 6 孔板中培养，使用 MatriClone，在 mTeSR™ Plus 培养基中，使用 0.25µg/cm² 的浓度进行培养。

将 MatriClone (0.25 µg/cm²) 、10% CloneR 加入 mTeSR Plus 培养基中，制备浓度为 9,750个/ml 的单细胞悬液，使用 VIPS PRO 进行单细胞铺板，将细胞铺入到 5x96 孔板（Corning^® TC - 处理）中。

将细胞从 DAY0 至 DAY10 进行全孔成像，追踪克隆生长。并对 VIPS PRO 铺板的克隆进行多能性评估，使用 SSEA4、OCT4 和 DAPI (Invitrogen™，A24881) 进行免疫组学染色。

图 1：使用 VIPS PRO 及 MatriClone 进行单细胞铺板流程图

VIPS PRO 联合 MatriClone 提高 iPSC 的细胞铺板率及恢复率。

VIPS PRO 联合 MatriClone 使用，相对于有限稀释 (LD) ，能够显著提高单细胞铺板率（图 2）以及单克隆恢复率（图 3）。

图 2：单细胞铺板率。LD（灰色），VIPS PRO（蓝色）数据平均值±SEM (n=5)

图 3：单克隆生长率。LD（灰色），VIPS PRO（蓝色）数据平均值±SEM (n=5)

iPSC 在铺板及生长阶段维持稳定性以及干性。

使用 MatriClone 作为基质胶培养的 iPSC 克隆团形态完整，具有明显边界，细胞紧密排列，核质比高（图 4）。

图 4：铺板后 DAY10 iPSC 整孔图像；a) 整孔图像；b) iPSC 克隆团放大图像

图 5：VIPS PRO 铺板后进行 SSEA4 和 OCT4 免疫组化染色

我们对铺板后的克隆团进行干性基因 SSEA4 和 OCT4 的检测，结果显示，使用 VIPS PRO 进行铺板不会影响多能性。

VIPS PRO、MatriClone 和 STUDIUS 的组合为 iPSC 工作流程提供了一种有力的解决方案：