凝胶法细菌内毒素检查干扰消除的物理方法

一、加热灭活

对由于蛋白质或酶的修饰而表现的抑制作用或导致鲎试剂变化的药物本身是蛋白酶类，可通过加热灭活处理来消除干扰，或使用超过滤薄膜法去除。如将血浆1：10稀释，70 ~80℃加热5 min可破坏血浆蛋白酶抑制物，而且内毒素没有明显的损失，另外还可将血清样品在沸水中加热2~3 min再稀释至少10倍。

二、样品稀释

王欣放等^[1]采用不同厂家的鲎试剂对不同厂家的3批注射用对氨基水杨酸钠分别进行干扰试验。结果，将样品稀释至7.5 mg/ml以下时可消除干扰作用，使用灵敏度为0.125 EU/ml的鲎试剂进行细菌内毒素检查时结果均符合规定。

王超华等^[2]对大蒜注射液细菌内毒素检查法的结果表明，将供试品10倍稀释后可消除干扰。

吴文飞^[3]对3种无菌冲洗剂细菌内毒素的检查方法进行了探讨，其中硫酸新霉素灭菌溶液在pH 3.2~3.8时，4倍稀释后无干扰。

应注意，有些样品如碳酸氢钠注射液因碱性较强且主要成分碳酸氢钠含量较高，因此单纯稀释是不能排除干扰的，必须经过调节药品的pH处理后再稀释，才能排除干扰^[4]。

三、容器材质选用

内毒素稀释管应该是高质量硼硅酸盐玻璃材质，以避免内毒素吸附于试管壁。不可使用塑料用具，因其伴随很多未知的干扰因素。同时避免使用聚丙烯试管，因为由聚丙烯材料制成的窗口对内毒素的吸附也被公认为是干扰内毒素检查方法的因素之一。因此，任何聚丙烯材料的试验器材不可用于试验中，但有实验证明由聚丙烯材料制成的加样头，与实验溶液的短暂接触对内毒素的回收没有影响。

参考文献：

[1] 王欣放.注射用对氨基水杨酸钠的细菌内毒素检查方法[J]．中国药业,2008,17(6):38-39

[2] 王超华.大蒜注射液细菌内毒素检查法的探讨[J]．西北药学杂志，2007,22 (2):75

[3] 吴文飞.3种无菌冲洗剂细菌内毒索检查方法初探[J].中国药房,2007,18 (16)；1262-1264

[4] 徐富墙,李万玉,赵语.碳酸氢钠注射液进行细菌内毒索检查的研究[J].中国药房,2000,ll(2)：65-67

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