鲎试验法种类及比较

科德角国际生物医学科技（北京）有限公司

2022/11/15 16:03

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根据反应机理的不同又可将鲎试验法分为以凝胶的形成作为指标的凝胶法，以凝胶的浊度变化作为指标的比浊法以及显色合成基质水解显色作为指标的比色法，其中以定性的凝胶法收载最为普通（表3）。

根据反应机理的不同，主要可分为以下几类：

（1）凝胶法（Gel-Clot technique）：可在0.03Eu/ml的范围内进行半定量测定。

（2）比浊法（Turbidimetric Assay）：通常在0.006 ~ 300Eu/ml的范围内进行定量。

（3）比色法（Colorimetric Assay）：操作比较复杂，但灵敏度和精确度高。通常在0. 006~15Eu/ml的范围内进行定量。

（4）ELISA（Enzyme-Linked immunosorbent assay）：用鲎试剂与酶联吸附免疫测定法联合检定微量内毒素的方法。

（5）以巨噬细胞产生的细胞分裂素（Cytodines）：作为机体反应指标的热原检查系统。

凝胶法：即在100 x 75mm的小试管内，加入待检样品的鲎试剂混合。37℃60分钟保温反应后，180°倒转，根据凝胶形成的有无作为判定指标的一种半定量法。此法操作比较简单、经济，而且不需要专用测定仪器。可在0.03Eu/ml的范围内进行半定量测量。

比浊法：根据内毒素与鲎试剂的（C因子）反应机理，被激活的凝固酶切断凝固蛋白原中特定位置的精氨肽链。形成凝固蛋白，产生凝胶的浊度变化，适当的浊度测定仪进行定量的一种方法。可分为Endopoint Assay和Kinetic turbidimetric Assay。此法操作简单、经济、灵敏度高、检测范围广。通常在0. 006~300ET/ml的范围同时进行定量。但需要专用仪器。

比色法：根据被内毒素激活的凝固酶水解鲎三肽中精氨酸肽链。释放出对硝基苯胺（PNA黄色A405nm）用冰醋酸中止反应进行吸光度测定，或用游离的PNA和偶氮试剂反应，最终形成偶氮蓝复合物显色（红色A 545nm）而进行比色测定的一种方法。可分为Endopoint Assay和Kinetic turbidimetricAssay。此法操作比较复杂。但灵敏度、定量性和精度都高。通常在0. 006 ~15Eu/ml的范围内进行定量，而且更微量的内毒素也可定量。目前主要用在血液﹑体液中的微量内毒素的测定方面。

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