产品引见:
德国Unchained高通量多功用蛋白稳定性剖析仪Unit/Uncle是得到蛋白分子构造稳定性、汇集稳定性、胶体分散稳定性等多品种型数据的设备。该设备既能运用经典办法处置数据,又新增加种剖析形式;既可取得单一类型数据,又可对多品种型数据同时测定整合剖析;既保证了数据质量,又完成了数据品种和通量;并且样品用量少,操作简单快捷,更可以处理蛋白样品数据取得过程中的问题。以此近期多篇应用该设备得到的实验结果高质量文献发表。
一、产品参数
1.基于内源性荧光、动态光散射和静态光散射原理;
2.可测定Tm(变性温度);
3.可测定Tagg(汇集起始温度);
4.可测定Sizing(蛋白颗粒直径即粒度)和PDI(分散度);
5.可测定B22(第二维里系数)、kD(扩散系数);
6.可一次测定1~48个viscosity(黏度);
7.可测定ΔG(吉布斯自在能变)和ΔG Trend(自在能改动趋向);
8.可用于研讨蛋白Isothermal stability(等温稳定性)、Thermal recovery(热恢复实验);
9.Tm值计算模型可采用350/330比值法、曲线下面积法、质心波长法以及发射峰法4种办法计算;
10.根据蛋白内源性的芳香族氨基酸的荧光改动测定Tm时,无需添加化学染料;
11.也可依据蛋白详细需求添加特异性蛋白染料如ANS,SYPRO Orange等;
12.不同样品/制剂条件在独立样品池中封锁检测,不存在穿插污染的可能;
13.粒度检测范围:0.3-1000 nm;
14.可测定蛋白样品浓度范围:50µg/ml~150 mg/ml(以IgG为例);
15.一次可同时测定1~48个样品,每个样品≤9 uL;
16.温度控制范围:15℃-95℃;
17.升温速度0.01-10℃每分钟;
18.温度控制精度0.01℃;
19.配有270nm~720nm全光谱高灵活CCD;
20.装备266nm、473nm和660nm三根激光器;
21.装备简单易用的操作软件和功用强大的剖析软件;
22.仪器无需求定期改换的配件,实验完成后不需求对仪器停止清洗维护;
二、仪器设备工作原理
(1)工作原理
采用蛋白分子中芳香族氨基酸内源性荧光检测蛋白构造稳定性(Tm),蛋白分子变性过程中,其构造逐步翻开(unfold),疏水构造域逐步暴露于水性环境,包埋于疏水位点的芳香族氨基酸其荧光发射属性改动,从而能够得到蛋白变性曲线,定量计算出Tm;采用静态光散射(SLS)技术检测蛋白汇集稳定性,蛋白变性过程中,其构造逐步翻开,疏水位点逐步暴露,到达一定水平(温度)时,蛋白分子开端汇集,招致散射光信号增加,从而肯定蛋白汇集起始温度。此外,采用动态光散射(DLS)停止粒度及粒度散布剖析,黏度剖析以及胶体分散稳定性剖析(B22和kD)。
(2)与传统办法的剖析
现有蛋白/抗体/疫苗稳定性检测技术及办法主要包括:孵箱法分离分子排阻层析(SEC)、PCR技术(染料法)、DSC技术和DSF技术(染料法)。(1)孵箱法分离分子排阻层析(SEC)。通常将孵箱设置为30~40℃,将候选蛋白/抗体/疫苗分子及/或不同制剂配方放置于孵箱中,定期取样察看/检测,基于终点法检测,应用极为普遍,能够称之为“金规范”,但工作量大,任一个候选药物分子或者制剂配方均需求多份反复,以便不同时间取样检测;并且该办法时间周期较长,通常需求半年或更久;样品用量较大。(2)PCR技术基于染料法检测蛋白构造稳定性,通常采用SYPRO Orange,蛋白在加热过程中逐步变性,疏水构造域逐步暴露,荧光染料与蛋白疏水构造域分离并且荧光发射属性改动,特别取得蛋白变性曲线,可定量计算出蛋白变性温度(Tm)。该办法优点为通量较高,蛋白用量少,检测本钱低。但随着技术进步,该办法在工业范畴应用逐步被替代,其缺陷主要为基于蛋白染料检测,间接检测方式,蛋白变性过程中染料基于疏水作用与蛋白吸附,这种互相作用存在影响蛋白变性过程的可能,从而招致检测结果偏向。(3)DSC技术在蛋白/抗体稳定性剖析中比拟经典,可定量测定蛋白变性温度和变性起始温度,工业范畴应用广发。但是该办法存在样品用量大(130uL,26ug)、通量低(一次实验1个样品,24小时全自动化仅能剖析50个样品);单一样品池,存在穿插污染可能。(4)DSF技术最初应用于PCR为代表的染料法,近几年也逐步摒弃染料,采用相似UNcle的检测办法,即基于蛋白芳香族氨基酸的内源性荧光,也能做到高通量和多参数,样品微量化。但其存在的缺陷也十分明显,Tm检测数据剖析模型单一,仅仅依赖于比值法(350nm/330nm),汇集稳定性剖析技术单薄,没有粒度散布剖析、黏度剖析、胶体分散稳定性剖析。等温稳定性剖析等等。此外,以上一切技术或办法均存在检测参数单一的问题,而生物大分子稳定性剖析及其制剂开发需求多方面检测,包括构造稳定性剖析,汇集稳定性剖析,胶体分散稳定性剖析,粒度散布剖析,黏度剖析等等。UNcle高通量多参数蛋白稳定性检测与制剂开发系统具备一切以上特征,同时兼具高通量、样品微量化特性,可成倍提升工作效率。
三、仪器设备在国内外运用状况
UNchained Labs是全球第一家、也是目前独一一家专注于开发并提供蛋白/抗体稳定性剖析以及生物制剂配方挑选与评价工具与处理计划的公司;UNchained Labs公司具有世界一流的工业与行业监管用户,包括美国食品药品监视管理局(FDA)、美国国立卫生研讨院(NIH)、亚力兄制药(Alexion),百时美施贵宝(Bristol Myers Squibb),礼来(Eli Lilly),基因泰克(Genentech),吉利德(Gilead),葛兰素史克(GlaxoSmithKline),诺华(Novartis),辉瑞(Pfizer),罗氏(Roche),赛诺菲(Sanofi),安进(Amgen),雅培(Abbott),艾伯维(AbbVie),拜耳(Bayer),杨森(Janssen),龙沙(Lonza),默克(Merck)等;国内用户包括中检院、百奥泰、绿叶制药、恒瑞研发、苏州信达、康宁杰瑞、德思特力、华博生物、强生中国研发中心、宝船生物、上海肿瘤研讨所、苏州大学、清华大学、中国计量科学院、舒泰神、义翘神州、军科华仞、中国农业大学等。全球装机超越150套,国内超越20套。
四、仪器设备与同类仪器设备的比拟剖析(提供不少于三家国内外厂商同类型仪器设备性能、价钱比拟);
德国Unchained高通量多功用蛋白稳定性剖析仪Unit/Uncle信息由广州华誉仪器科技有限责任公司为您提供,如您想理解更多关于德国Unchained高通量多功用蛋白稳定性剖析仪Unit/Uncle报价、型号、参数等信息,欢送来电或留言咨询。
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