1、图象吸取
凝胶成像体系选用数码摄影将吸取的图象直接输入核算机体系。在暗箱中的紫外灯照射下,经过调节变焦光圈、变焦倍数及焦距使样品明晰及大小适当。图象吸取获得今后,经过图象处理软件软件中图象处理菜单的“亮度”和“优化”项进行亮度调整和图象优化,以降低图象本底噪声。
凝胶成像体系经过这样处理今后能得到明晰的凝胶图片,同时在图象中加入文字信息进行适当注释,用热敏打印机或现在常用的高品质照片级喷墨打印机打印今后,能够得到符合文章发表要求的照片打印。
2、分子量定量
关于一般常用的DNA胶片,使用凝胶成像体系的图象处理软件中分子量定量功用,经过对胶上DNA Marker条带的已知分子量注释,主动生成拟合曲线,并以它衡量得到未知条带的分子量。经过这种方法所得到的成果较肉眼调查估量要准确很多。
3、密度定量
一般常用的测定DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)浓度的方法是紫外吸收法,但它只能测定样品中的总核苷酸浓度,而不能区分各个长度片段的浓度。但使用凝胶成像体系和图象处理软件软件,关于DNA胶片上某一已知其DNA含量的标准条带,在调节阀值和积分框并进行密度标定今后,能够便利的单击其他未知条带依据其光密度值得到其DNA含量。
凝胶成像体系比紫外吸收法便利,能够测出不同长度的片段的含量,而所得成果关于分子生物学操作要求的准确度是足够的。值得指出的是,凝胶成像体系也适用于对PAGE蛋白胶条带的浓度测定。
4、密度扫描
在分子生物学和生物工程研讨中,Z常用到的是对蛋白表达产品占整个菌体蛋白的百分含量的核算。传统的方法是使用专用的密度扫描,但使用生物分析软件结合现在试验室惯例配备的扫描仪或许直接用白光照射的凝胶成像体系就能完成此项工作。
挑选凝胶成像体系的密度扫描指令,能够将代表某一微生物菌株的泳道图象用虚线框住今后,即可得到对此区域的纵向扫描曲线图。一般挑选主动积分选项能够主动核算出对应于各个胶带的每个峰面积相关于整个曲线所占的百分比,也能够选手动积分,人工挑选积分区域,关于某些条带较弱,本底较高的图谱能够进行基线调整,在误差的允许范围内得到更佳的试验成果。
5、PCR定量
PCR定量主要是指,作为PCR试验时如果扩增出来的条带不是一条时,使用此指令能够核算出各个条带占总体的相对百分数,凝胶成像体系这个功用与密度扫描相似,但实践在原理上并不相同。PCR定量并不对挑选区域生成纵向扫描曲线图并积分,而是对选定的几条带进行相对密度定量并核算其占总和的百分数。
凝胶成像体系在分子生物学和生物工程研讨中简直每天都要遇到的研讨工作中所具有的功用,由于结合生物处理软件能够覆盖现代生物科学日常研讨的各个领域并能够替代某些专用试验设备,凝胶成像体系应该是现代分子生物学和其他生物科学试验室的常备仪器,不仅如此,它也能用于医学临床检验。
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