为确保分析结果的准确性和重现性,在使用通用型反相色谱柱前,需要进行样品前处理。建议使用活性相来溶解样品,并使用予处理柱除去强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。同时,使用0.45μm的过滤膜过滤样品以去除微粒杂质。
通用型反相色谱柱的保养:
在使用通用型反相色谱柱前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为评价柱性能变化的参考。但要注意,柱性能可能因使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。在进行柱性能测试时应按照色谱柱出厂报告中的条件进行测试,以保证结果的可比性。
在对色谱柱使用前进行测试以后,根据不同情况对色谱柱进行保养:
每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,在实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意,不能用纯水冲洗柱子,应在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
长期保存色谱柱:如需要长时间保存色谱柱,必须存储于合适的溶剂中。反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温。
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