瑞士SpiroChrome活细胞标记探针使用常见问题答疑
1. 探针在室温下是否稳定?
是的,探针在室温下可以稳定几天。然而,它在很大程度上取决于探针和溶剂。建议将所有探针或其溶液保存在-20°C。
2. SiR探针或SPY探针对细胞有毒吗?
是的,在一定阈值以上,两种探针都显示出对细胞增殖和改变肌动蛋白或微管动力学的一些影响。
然而,这些探针的毒性比它们的母体药物小几个数量级。
对于SiR探针,我们建议使用100 nM浓度,对于SPY探针,我们建议将DMSO原液1:1000稀释。
3.将探针溶解在二甲基亚砜中,溶液无色,这正常吗?
是的,在DMSO中,探针主要呈无色螺旋状,溶液的颜色可以变化,取决于探针,从无色到淡色。这并不影响探针的染色效率。
4. 探针能在固定细胞上使用吗?
我们用于肌动蛋白、DNA和溶酶体的SiR和SPY探针可用于PFA固定的细胞。如果细胞在固定前被标记,用于微管的SiR和SPY探针对固定细胞不起作用,也不能在固定步骤中存活。
5. STORM成像可以使用SiR探针或SPY探针进行活细胞成像吗?
不行。在STORM成像中通常使用的非常高的光强度下,通常在活细胞上观察到激发光的光毒性。需要较少激发光功率的SMLM技术可能是合适的。
6. 哪些生物和组织被SiR探针染色?
此列表仅报告已知的工作细胞系、组织或生物体。
如果一个细胞系、组织或有机体不在列表中,并不意味着它不会被我们的探针染色。
智人: U2OS、成纤维细胞、HeLa、HUVEC、MCF-10A、HCT-116、A549、红细胞
小家鼠:C2C12, IA32,骨骼肌,原代心肌细胞,原代卵母细胞
褐家鼠: 初级海马下神经元,初级皮层神经元,NRK
长尾猿: COS-7
中孔鲸: BHK。
黑腹果蝇: 非上皮,S2。
袋狸: OK细胞。
金鱼: 视网膜双极细胞
斑马鱼: 视网膜双极细胞
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7. SiR探针在三维细胞培养中起作用吗?
是的,探针能够在三维生长环境中染色细胞,如球体和类器官。
8. SiR荧光团的修正系数CF260和CF280是什么?
CF260 = 0.116
CF280 = 0.147
9.我们公司的技术背景
我们的技术是基于专利的荧光团硅罗丹明(SiR )。SiR是一种光亮、耐光的类罗丹明染料。其主要特点是细胞通透性、荧光性和与超分辨率显微镜的相容性。荧光激发和发射在活细胞成像实验中呈远红色,降低了光毒性。SiR 与大多数显微镜兼容,因为它可以在标准Cy5设置下使用。所有这些特性的结合使基于SiR based的探针有别于其他荧光探针。请在《自然化学》的这篇论文中阅读更多关于SiR的特性。
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