发展近30年,PCR技术已成为分子实验室最常规的实验手段。《纽约时报》曾高度评价该技术“高度创新,非常重要”。如今,随着技术发展,PCR不只被应用于生命科学研究,还广泛用于临床诊断、药物分析、食品安全、法医鉴定和疾控等领域中。
2020年4月16日—17日,由仪器信息网举办的第四届PCR技术网络大会成功召开。本次大会为期2天,共吸引近1300名网友参会。24位PCR技术研发与应用专家分别在“新仪器与新技术”、“病原体核酸检测”、“分子生物学研究”、“精准医疗”4个主题下作了精彩的报告分享,以下是部分视频回放内容。
“新仪器与新技术”专场
本专场报告嘉宾
方群(浙江大学),报告主题《基于微流控液滴技术的自动化PCR分析系统》
本报告介绍了作者研究组基于具有自主知识产权的序控液滴阵列(Sequential Operation Droplet Array,
SODA)技术所发展的多种自动化核酸分析系统,包括可实现单细胞捕获、细胞裂解、RNA逆转录、PCR扩增、荧光检测等操作的单细胞MicroRNA
RT-PCR分析系统、多体积数字PCR绝对定量分析系统,以及可自动完成核酸提取、逆转录、PCR扩增、荧光检测的集成化、低成本RT-PCR分析系统。
鲁书林(Fluidigm),报告主题《聚焦COVID-19,Fluidigm微流控技术在流行病学研究中的应用》
Fluidigm独有的微流控芯片技术,
全封闭独立的qPCR反应仓特点使得多样本、多目标的自动化快速检测成为可能,能够在较短时间内准确甄别致病病原体、相似症状的病原体差异等,助力公共卫生系统迅速建立有效预警方案,尽早阻止疫情的蔓延。同时系统配套的实时dPCR微流控芯片可以对低病毒载量样本进行准确定量,提高检测灵敏度。另外,系统还可实现NGS文库制备功能,自动化构建病原菌NGS文库。Fluidigm高通量、多功能微流控技术带来以极小量样本获得大数据的优势,特别适合用有限的病人样本研究病毒毒力因子导致的复杂的宿主免疫系统变化,有助于明确新型冠状病毒的致病机理,鉴别出易感人群的特征。
陆瑶(中科院大连化物所),报告主题《基于微流控芯片的单细胞分泌谱集成化分析》
细胞是生命存在的基础,探索生命健康与疾病常需要以细胞研究为基础。由于细胞与细胞之间存在差异,群体细胞研究得到的平均结果往往会掩盖个体差异信息。为更全面的了解细胞以服务人类健康、疾病研究,单细胞分析就变得尤为必要。在过去的几年中,我们开发了一系列的基于微流控芯片的高通量、高内涵单细胞细胞分泌分析工具,大大加深了人们对细胞分泌异质性的认识,并有可能应用于临床实现个体化、精准医疗。
杜文斌(中科院微生物所),报告主题《基于界面振动微滴阵列技术的数字PCR系统》
PCR仪是一种精密分子检测仪器。作为第三代绝对定量PCR技术,数字PCR仪的微流控单元设计是主要难点。杜文斌团队提出了一种新的界面振动液滴制备技术,建立了无芯片的数字PCR液体工作站模式,简化了实验操作,大大降低数字PCR使用成本。报告将介绍杜老师自主研发的自动化数字PCR系统的特点及初步应用情况。
王怀舟(小海龟科技),报告主题《数字PCR技术发展动态及应用新场景》
数字PCR是近年来迅速发展起来的一种定量分析技术。其特点是结果判定不依赖于扩增曲线的循环阈值(Ct)、不受扩增效率影响、良好的准确度和重现性,并且可实现绝对定量分析。数字PCR已经在科研、临床等领域显示出巨大的技术优势和应用前景。本报告主要介绍dPCR基本原理、主流商业化dPCR平台特点及演变趋势、应用新场景。
“病原体核酸检测”专场
本场报告嘉宾
张选(锐讯生物),报告主题《锐讯数字PCR解决方案助力抗击新型冠状病毒疫情》
陈力(复旦大学),报告主题《ddPCR for infections 疫与病中的数字PCR》
新冠病毒是对人类及个体的重大危害。如何利用我们手上的检测手段,去有效的应对这一时艰,是大家的共同挑战和关注。数字PCR技术,具有可定量对比,样本处理简便等技术特点,为我们提供了一种新的技术手段。讲座的主要内容,是数字PCR的发展现状及应用实例。
刘家云(空军军医大学),报告主题《新型冠状病毒核酸检测及质量控制》