HPLC柱后衍生法测定茶及茶饮料中的糖类

茶叶中的糖类包括单糖、寡糖、多糖及少量其他糖类，是茶汤滋味和香气成分之一，是茶汤的主要甜味成分。而糖类也经常被作为添加剂添加到茶饮料中，调节茶饮料的香气和滋味。各种茶中含有的糖的种类和含量各不相同。

在高效液相色谱仪（HPLC）测试中，糖类的分子由于没有共轭结构，无法用紫外检测器进行检测，通常采用通用型检测器，如示差折光检测器（RI）进行检测。但采用RI检测器有两个明显的缺点：灵敏度低、不能梯度洗脱。采用磷酸-苯肼柱后衍生法测定糖类，可以克服RI检测器的以上两个缺点。

下面使用日立高效液相色谱仪Chromaster配高灵敏度的荧光检测器，采用磷酸-苯肼柱后衍生法进行茶及茶饮料中糖类的测定：

■ 分析流路图

仪器配置: Chromaster 5110 泵，5210 自动进样器，5310 柱温箱，5440 荧光检测器，5510反应单元

■分析条件

■糖标准样品测定例

√ 重现性（100 mg/L 糖标准混合液，n=6）

√ 各种糖成分在10 ~ 500 mg/L标准混合液的浓度范围内，得到了R² ≥ 0.9996良好的线性关系。

■茶样品测定例

对市售的茶叶（铁观音，普洱茶）和茶饮料（冰红茶，绿茶，乌龙茗茶）进行前处理，并对处理后的样品进行分离和检测。

√ 样品前处理方法

√ 测试结果

实验结果表明：利用磷酸-苯肼柱后衍生法进行茶及茶饮料中糖类的测定，使用Chromaster柱后衍生系统配备CM5440荧光检测器。糖经色谱柱分离后，再与磷酸-苯肼溶液在高温下反应，然后进行检测。该方法选择性强，灵敏度高，并且梯度洗脱可以多种糖成分同时分析。克服了示差折光检测器测糖灵敏度低、不能梯度洗脱的缺点。