What？又是方法重现性！(上篇）

这种问题经常出现在使用检测过其他项目的色谱柱进行方法开发，再换色谱柱进行重现时发生。这种情况是因为，有些特殊物质（可能是样品中的微量杂质或强保留物质）会吸附在填料上无法洗脱下来，这种情况就会对色谱柱造成改性。在检某些特定成分时，会影响成份的保留能力，导致更换色谱柱后无法重现分离效果。避免这种情况zui好的办法就是方法确定后马上用新色谱柱进行结果重现。如新柱无法重现结果，就有很大的可能是旧柱子被改性引起的。

有时，使用没有测过其他项目的色谱柱进行方法开发，后面重现的时候，也会发生更换柱子无法重现的情况。这是因为，方法开发过程中会使用到很多的不同条件及不同前处理方法处理的样品，这种情况，也可能使色谱柱改性。因此，哪怕是用没做过其他项目的色谱柱进行方法开发的，方法确定后，也需用全新的色谱柱进行重现。

色谱柱使用极限条件（如高pH值，高温，低pH值等），导致色谱柱受损，在这种色谱柱上开发的方法，在更换新柱时，也经常会出现无法重现的情况。高pH值会引起硅胶溶解，色谱柱塌陷；低pH值会导致键合相容易脱落，高温会导致填料塌陷，板结等情况，使色谱柱的保留能力发生变化。因此，使用这种条件的方法，方法确定后，一定要用新的色谱柱进行重现。

色谱柱使用过含离子对试剂的条件，离子对试剂会使色谱柱改性，无法完全冲洗干净，因此，使用过离子对试剂的色谱柱建议专柱专用。