干货分享 | 核酸提取总是出问题？三个细节帮助你避免失败！
常见的核酸提取方法有沉淀法、离心柱法和磁珠法，提取步骤基本分为裂解、洗涤和洗脱，这其中需要注意的细节很多，一处出错都容易导致失败。
在核酸提取过程中，常见的问题主要有产物得率低、产物降解或试剂残留。针对这些问题，下文整理了具体的应对方法，希望能帮大家避坑。
壹
提取的核酸得率低
☛ 样品量与试剂的配比要控制在一定范围，避免超过裂解能力；
☛ 破碎研磨的步骤处理细节很重要，一定要充分研磨，这是核酸提取的首要条件；
☛ 在洗脱的步骤，使用足量的洗脱液洗脱并充分混匀，避免有团块残存；
☛ 实验耗材要匹配，如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同，也会影响核酸的得率。
贰
提取核酸出现降解
☛ 提取的样品量要符合试剂的配比，尽量控制样品量达到合适比例；
☛ 每个步骤都要注意充分的混合均匀，避免团块的残留影响实验结果；
☛ 在洗脱时，时间过长或者温度过高，核酸有可能会降解；
☛ 样本切记不可反复冻融，提取的样本要注意在合适的温度保存，长期保存尽量-80 ℃。
叁
提取到的核酸纯度不够高，甚至抑制物残留影响下游实验
☛ 样本量和裂解液等试剂的配比要尽量控制到合适的范围；
☛ 混合均匀以确保裂解充分和没有团块残留；
☛ 晾干的步骤要充分，否则可能会导致醇类等杂质的残留；
☛ 磁棒振荡幅度太小或混合时间太短，磁珠上有杂质残留会影响磁珠吸附核酸的能力。
来源于：深圳逗点生物技术有限公司
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