【飞诺美色谱】动物源性食品中金刚烷胺的检测 SPE-LC-MS/MS 法

金刚烷胺是由金刚烷与溴进行卤化，再与乙腈在硫酸中反应，生成酰胺，再用碱水解而得。它可用于亚洲甲- Ⅱ 型流感的预防和早期治疗，与抗菌素合用可治败血症和病毒性肺炎，并有退烧作用。也有抗震颤麻痹的作用，可适用于帕金森病的治疗。根据其药理作用，国内现在主要将金刚烷胺用于鸡、猪流感的预防和早期治疗，及猪传染性胃肠炎的防治。

鉴于金刚烷胺会在动物组织中有残留，所以政府有关部门开始禁止使用金刚烷胺等防治高致病性禽流感等一类病原微生物引起的病毒性疫病。我国对于动物源性食品中金刚烷胺残留含量的相关研究报道属于空白，也未曾制定或立项过国家标准、行业标准，国际上也无特定限量要求及相应检测方法。

本文采用甲醇-1% 三氯乙酸萃取、Cleanert® PCX 固相萃取净化、液相色谱- 质谱/质谱 (LC-MS/MS) 技术建立动物源性食品中的金刚烷胺残留量的分析方法。

1. 样品提取

准确称取 2 g (精确至 0.01 g)试样至 50 mL 离心管中，加入 10 mL 甲醇-1% 三氯乙酸 (50+50，v/v)溶液，漩涡30s，超声 30 min，8000 r/min离心 10 min，上清液用一次性专用过滤器 注射器转移至 Qdaura ® 卓睿全自动固相萃取仪上样管中，Cleanert ® PCX 固相萃取柱也置入萃取仪中待净化。

2. 净化方法

设置 Qdaura ® 卓睿全自动固相萃取仪程序如下：3 mL甲醇，3 mL 水活化；加样 5 mL；淋洗： 3 mL 2% 盐酸，3 mL 甲醇淋洗；空气吹干小柱，洗脱：5 mL 氨水-甲醇- 异丙醇溶液 (5+80+15，v/v/v) 洗脱并收集。以上步骤控制流速均为 1 mL/min。

取出收集管，在 50℃水浴中氮气吹干，加 1.0 mL 甲醇-水-甲酸溶液 (10+90+0.1，v/v /v)溶解，用 0.22 µm 滤器过滤后供 LC-MS/MS 测定。

3.检测方法

3.1色谱条件
色谱柱：Venusil® ASB C18
2.1×150 mm，3 µm，150 Å； 流 速：200 µL/min；
柱 温：30℃； 进样量：5 µL；
表 1 液相色谱分析流动相条件

3.2质谱条件
电离模式：电喷雾电离正模式； 检测方式： 多反应监测 (MRM)；
离子源温度 (TEM)：550℃，Curtian Gas: 10，Ion Source Gas 1: 70，Ion Source Gas 2:75

4.实验结果

5.订货信息