【飞诺美色谱】食品中甲醛的测定 HPLC 法

社会上先后报道存在用甲醛溶液喷洒白菜保鲜的现象，甲醛之所以能保鲜是能够延缓白菜的腐烂和霉变，其可以使蛋白质变性，同时也能溶解脂肪，故有杀菌和保鲜作用。此外，甲醛还是一种重要的工业有机原料，广泛用于合成纤维、皮革工业、医药、染料等工业等。

但是甲醛是一种破坏生物细胞蛋白质的原生质毒素对人体有很大的危害。吸入甲醛可以引起食欲减退、厌食、体重减轻、衰弱、失眠症。甲醛对中枢神经系统有麻醉作用，此外甲醛还能损伤细胞内的遗传物质是可疑的致癌物质。

国家纺织产品基本安全技术规范《GB 18401-2010》中规定纺织品中甲醛含量不得大于 20 mg/kg，对于食品，甲醛更是非法添加物质，啤酒和白菜规定不得人为添加，啤酒中规定不大于 2 mg/L。本实验采用水提取法，最低检测限可到 1.0 mg/L，经实验证明该方法检测效率高，检测限低，适合做甲醛的检测。

1.实验试剂

1.1 样品：市售白菜；市售啤酒

1.2 DNPH 标准溶液：称取 6 mg DNPH 固体，溶于 20 mL乙腈，摇匀；

1.3 DNPH 衍生剂溶液：移取 0.3 mL DNPH 标准溶液，用乙腈稀释至 30 mL；

1.4 甲醛溶液：分析纯，含量 37%~40%

1.5 甲醛储备液：准确移取 38 µL 甲醛溶液，加水稀释至 10 mL；

1.6 甲醛标准稀释液：准确移取甲醛储备液 1 mL，加水稀释至 20 mL；

2.样品处理

2.1白菜样品前处理
准确称取 1 g 白菜试样两份，分别置于 60 mL 样品瓶中，并分别加入 50 µL 和 100 µL 甲醛溶液，混匀，再分别加入 50 mL 水，摇匀，40℃ 加热提取 30 min。取 1 mL 提取液，加入 1 mL DNPH 衍生剂溶液，混合均匀，60℃ 衍生 30 min，即为试样溶液。试样溶液通过 0.45 µm Nylon 针式过滤器过滤，待测。

2.2啤酒样品前处理
移取 5 mL 啤酒试样两份，分别置于 60 mL 样品瓶中， 并分别加入 50 µL 和 100 µL 甲醛溶液，混匀后取出 1 mL， 加入 1 mL DNPH 衍生剂溶液，常温衍生 30 min，即为试样溶液。试样溶液通过 0.45 µm Nylon 针式过滤器过滤，待测。

3.实验试剂
色谱柱：Venusil® XBP C18(L)
(5 µm，150 Å，4.6 × 250 mm)； 流动相：乙腈：水=1:1
流 速：1.0 mL/min
进样量：10 µL 波 长：360 nm 柱 温：30℃

4.实验结果

4.1线性关系和检出限
量取一定量甲醛标准稀释液，分别加水稀释至 0.4 µg/ mL、0.8 µg/mL、2 µg/mL、4 µg/mL 和 8 µg/mL，依次进样，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合标准曲线方程并计算的最低检测限，结果见表1。
表 1 甲醛标准曲线、精密度和检出限

标准曲线方程	相关系数	保留时间RSD6	峰面积RSD6	检出限(S/N>3)
y =53273x – 56929	0.9903	0.278%	5.238%	1.2mg/L

4.2添加回收率

图 1 50 μL 添加白菜样品谱图

图 2 50 μL 添加啤酒样品谱图

5.订货信息

产品名称	规格包装	订货号
LC-10F 高效液相色谱仪	10 mL/min，梯度系统，200 - 800 nm 双波长检测器	FL-LC010GS
CC-100 分析型色谱柱温箱	温控范围：5-70℃；可安装 1-2 支 300 mm 色谱柱	CC-100
Venusil® XBP C18 (L) 液相色谱柱	4.6 × 250 mm，5 µm，150 Å	VX952505-L
针式过滤器 (Nylon)	0.45 µm，直径 13 mm，200/pk	AS021345
微孔过滤膜 (Nylon)	0.45 µm，直径 50 mm，100/pk	AM025045
一次性无针头注射器	5 mL，100/pk	ZSQ-5ML
1.5 mL 样品瓶	短螺纹透明带书写 32 × 11.6 mm，100/pk	1109-0519
1.5 mL 样品瓶, 样品瓶盖	9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫，45．Shore A 1.0 mm，100/pk	0915-1819
12 mL 样品瓶	螺纹棕色，100/盒	1509-1800
12 mL 样品瓶盖	100/包	1515-1748
30 mL 样品瓶	螺纹棕色，100/盒	2409-0923
30 mL 样品瓶盖	100/包	2415-1395
60 mL 样品瓶	螺纹透明，100/盒	2409-1089
60 mL 样品瓶盖	100/盒	2415-1395
甲醇	4 × 4 L/瓶	AH230-4
乙腈	4 × 4 L/箱	AH015-4