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保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招

实验室的高通量分析实验中常采用微孔板,而微孔板中生物或化学成分的稀释以获得预定的目标浓度,配制预定分析体积的体系等操作过程中均涉及到移液操作。移液操作的准确性和重复性将直接影响检测结果。获得分析体系中各成分的准确浓度以及准确的分析体系体积对正确解读分析结果至关重要。


多通道移液设备校验系统 MVS®能够验证任意手持式或自动化多通道移液设备(包括 1-384 通道)的性能,验证体积低至 10 nL。采用 MVS 进行体积校验不需要制备染料溶液,不需要绘制标准曲线,且无严苛的环境要求。


本文将分享 MVS 在生命科学质量控制 QC 实验室的部分应用,旨在让用户了解 MVS 平台的多功能性和实用性。


1

移液顺序与趋势:在实际应用过程中,移液设备会吸取较大的体积,然后分配较小体积到微孔板的多个孔、行、列甚至多个板中。MVS 可用于统计连续分液的体积变化趋势,以便科学家制定合适的实验操作手册 (protocol) ,使设备的最佳性能得到利用。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


8 通道移液装置在 96 孔板上的连续分液的体积变化趋势示意图。8 通道移液装置从 96 孔板的 1 至 12 列方向连续分配 20 μL 液体(左)。理论上每列孔中分配的体积应该是相同的,但实际体积会随着每次分配而依次降低(向下漂移)(右)。


2

移液体积随时间的变化趋势:MVS 可用于创建移液设备的移液体积随时间变化的趋势图,获得移液体积随着时间的漂移。只需几分钟,MVS 即可完成实验中关键步骤移液体积的准确度确认,减少实验失败带来的人力、时间和试剂费用的损失。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


3

多个移液设备的移液体积比较:MVS 的结果可通过 NIST(美国)和 NPL(英国)维护的标准追溯到 SI(国际单位制),因此可以直接比较不同通道(1,2,4,8,12,96 或 384 个分配通道)移液设备准确性。不受操作者,制造商或地理位置的影响。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


4

方法转移和数据一致性的确认:MVS 也可用于促进分析方法的转移。在将分析方法转移的前、中、后期,可以确认分析方法的移液体积临界值,并将其用作后续性能确认的基准。了解转移过程中每个设备的移液性能和动态,能够确保平稳转移,减少故障、设备停机时间和下游经济损失。


5

每个移液通道的重复性表征:多通道移液设备的每个通道可能表现出一些可变性,MVS 可进行多通道移液设备(如 8、12、96 和 384 通道)的通道-通道间的性能比较。确定“行为不正常”的通道,可以正确解释分析结果。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


6

可重复性样品的制备:如果多通道设备用于重复的制备关键样品和/或分析板,因为它涉及样品-样品或批次-批次的再现性,MVS 是跟踪设备性能的有用工具。例如在化合物的筛选实验中,将特征化合物分配到“母”板中,随后从“母”板吸取化合物,并分配至“子”板,用于“候选化合物筛选”。“子”板以复制的方式准备,样品的重复性对筛选结果至关重要。


7

昂贵和稀有样品试剂的检测:在进行稀有和/或昂贵试剂的分析之前对移液设备进行“抽查”能够有效避免试剂的浪费。MVS 易于使用,可在运行关键分析之前快速验证任何移液设备的性能。


8

可追溯的 GLP/GMP 符合性:MVS 凭借其具备的可追溯性,使 GMP 和 cGLP 实验室能够指定移液装置的标准操作流程 (SOP) 。例如,一家公司在其标准操作程序中采用了 MVS,实现了位于该国不同地区的三个不同实验室结果的直接比较。MVS 符合21 CFR Part 11,并可提供可追溯的结果,MVS 可使流程、文书工作和实验室结果的解释标准化。


9

操作验证 (OQ) 和操作流程优化:使用 MVS 能够为移液工作站进行操作确认 (OQ) 。MVS 可用于帮助优化移液工作站的每个可调参数,也可用于方法验证。可调的移液参数包括但不限于:(1) 前后气隙;(2) 排气容积;(3) 偏移量;(4) 干移液头 vs. 湿移液头;(5) 移液头类型、移液头质量、体积容量;(6) 新移液头 vs. 旧移液头;(7) 喷出/喷液速率;(8) 吸入/分配高度;(9) 移液头接触面;(10) 进入盛液容器的位置;(11) 混合;(12) 清洗步骤。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


优化吸取/分配参数前(上)和后(下)的多通道移液设备性能,优化后的移液体积落在更严格的公差范围内。


10

非水溶液和复杂溶液的处理:众所周知,虽然移液设备能够处理不同类型的溶液,但当溶液性质复杂时,设备的移液性能可能会发生显著变化。当处理水基试剂时,多种方法可用于校准/验证系统得移液性能(包括光度法和重量法)。然而,当处理复杂和/或非水试剂(如二甲基亚砜、血清、含洗涤剂的水基混合物等)时,公认的移液系统验证方法较少。利用 MVS,可以利用与待移液样品相似的标准液对移液系统进行验证, MVS 提供基于 DMSO、血清、PCR预混液等多种标准液,从而校准移液设备对非水基、复杂溶液的移取体积的准确性。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招

不同基质的测试液


该图显示了用水基标准液校准后的 MVS 用于移液器的验证,分别移取 8 μl 三种不同基质溶液的相对不准确性 % 和 CV % 。三种溶液分别是 (a) 90% 的二甲基亚砜 (DMSO) ;(b) 20% 甘油,(c) 50% 乙醇。


11

操作员/操作程序考核:MVS 还用于比较不同操作人员操作的移液性能,以及比较不同操作员编写的移液方法(软件脚本)的移液性能。当相同的实验操作手册在不同的实验室由不同的操作人员平行运行或每天运行时,MVS 可以帮助减少分析方法开发中的潜在错误。MVS 可以帮助培训操作人员使用正确的移液技术,使移液体积在特定的容差窗口内。


12

现场验收测试和预防性维护前、后测试:MVS 可以在安装新的液体设备期间或之后使用,以立即验证系统的性能。此外,它可以在现场服务前后使用,记录和验证性能的变化和调整。


13

保证逐级稀释精度:MVS 可用于评估采用移液设备进行稀释步骤的准确性。在 96 孔或 384 孔板中,MVS 能够测量到逐步稀释至起始材料的 1/2048。用户定义每个稀释步骤的精度公差限制。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


14

MVS 集成到工艺中的质量控制:MVS 可以集成到移液工作站,以实现更加自动化的体积验证。性能数据(每个移液喷头和每个孔)也可以以 XML 格式导出到公司的 LIMS 系统,以便完全控制验证过程。


15

成组测试板的批处理功能:用户可以通过存储板和溶液的条形码将体积验证的测试组简化为一种方法。消除在不同验证事件之间连续扫描条形码。


16

确定分析实验的公差:使用 MVS,您可以了解液体处理可变性对分析检测的影响,以及产生可接受的检测结果的移液体积偏差范围。通过调整和修改移液参数(随后使用 MVS 进行体积验证),可以简单地根据转移体积的准确性(注意,分析物浓度与体积有关)确定合格/不合格检测结果之间的直接相关性。



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Advanced Instruments成立于1955年,总部位于美国马萨诸塞州诺伍德,60 多年来一直致力于帮助生物制药,临床及食品饮料行业客户提升测试结果的质量,实现可信赖的实验结果,并不断提高企业的生产效率。


安达望(上海)科技有限公司是Advanced Instruments在中国依法成立的全资子公司。


来源于:Advanced Instruments

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实验室的高通量分析实验中常采用微孔板,而微孔板中生物或化学成分的稀释以获得预定的目标浓度,配制预定分析体积的体系等操作过程中均涉及到移液操作。移液操作的准确性和重复性将直接影响检测结果。获得分析体系中各成分的准确浓度以及准确的分析体系体积对正确解读分析结果至关重要。


多通道移液设备校验系统 MVS®能够验证任意手持式或自动化多通道移液设备(包括 1-384 通道)的性能,验证体积低至 10 nL。采用 MVS 进行体积校验不需要制备染料溶液,不需要绘制标准曲线,且无严苛的环境要求。


本文将分享 MVS 在生命科学质量控制 QC 实验室的部分应用,旨在让用户了解 MVS 平台的多功能性和实用性。


1

移液顺序与趋势:在实际应用过程中,移液设备会吸取较大的体积,然后分配较小体积到微孔板的多个孔、行、列甚至多个板中。MVS 可用于统计连续分液的体积变化趋势,以便科学家制定合适的实验操作手册 (protocol) ,使设备的最佳性能得到利用。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


8 通道移液装置在 96 孔板上的连续分液的体积变化趋势示意图。8 通道移液装置从 96 孔板的 1 至 12 列方向连续分配 20 μL 液体(左)。理论上每列孔中分配的体积应该是相同的,但实际体积会随着每次分配而依次降低(向下漂移)(右)。


2

移液体积随时间的变化趋势:MVS 可用于创建移液设备的移液体积随时间变化的趋势图,获得移液体积随着时间的漂移。只需几分钟,MVS 即可完成实验中关键步骤移液体积的准确度确认,减少实验失败带来的人力、时间和试剂费用的损失。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


3

多个移液设备的移液体积比较:MVS 的结果可通过 NIST(美国)和 NPL(英国)维护的标准追溯到 SI(国际单位制),因此可以直接比较不同通道(1,2,4,8,12,96 或 384 个分配通道)移液设备准确性。不受操作者,制造商或地理位置的影响。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


4

方法转移和数据一致性的确认:MVS 也可用于促进分析方法的转移。在将分析方法转移的前、中、后期,可以确认分析方法的移液体积临界值,并将其用作后续性能确认的基准。了解转移过程中每个设备的移液性能和动态,能够确保平稳转移,减少故障、设备停机时间和下游经济损失。


5

每个移液通道的重复性表征:多通道移液设备的每个通道可能表现出一些可变性,MVS 可进行多通道移液设备(如 8、12、96 和 384 通道)的通道-通道间的性能比较。确定“行为不正常”的通道,可以正确解释分析结果。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


6

可重复性样品的制备:如果多通道设备用于重复的制备关键样品和/或分析板,因为它涉及样品-样品或批次-批次的再现性,MVS 是跟踪设备性能的有用工具。例如在化合物的筛选实验中,将特征化合物分配到“母”板中,随后从“母”板吸取化合物,并分配至“子”板,用于“候选化合物筛选”。“子”板以复制的方式准备,样品的重复性对筛选结果至关重要。


7

昂贵和稀有样品试剂的检测:在进行稀有和/或昂贵试剂的分析之前对移液设备进行“抽查”能够有效避免试剂的浪费。MVS 易于使用,可在运行关键分析之前快速验证任何移液设备的性能。


8

可追溯的 GLP/GMP 符合性:MVS 凭借其具备的可追溯性,使 GMP 和 cGLP 实验室能够指定移液装置的标准操作流程 (SOP) 。例如,一家公司在其标准操作程序中采用了 MVS,实现了位于该国不同地区的三个不同实验室结果的直接比较。MVS 符合21 CFR Part 11,并可提供可追溯的结果,MVS 可使流程、文书工作和实验室结果的解释标准化。


9

操作验证 (OQ) 和操作流程优化:使用 MVS 能够为移液工作站进行操作确认 (OQ) 。MVS 可用于帮助优化移液工作站的每个可调参数,也可用于方法验证。可调的移液参数包括但不限于:(1) 前后气隙;(2) 排气容积;(3) 偏移量;(4) 干移液头 vs. 湿移液头;(5) 移液头类型、移液头质量、体积容量;(6) 新移液头 vs. 旧移液头;(7) 喷出/喷液速率;(8) 吸入/分配高度;(9) 移液头接触面;(10) 进入盛液容器的位置;(11) 混合;(12) 清洗步骤。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


优化吸取/分配参数前(上)和后(下)的多通道移液设备性能,优化后的移液体积落在更严格的公差范围内。


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非水溶液和复杂溶液的处理:众所周知,虽然移液设备能够处理不同类型的溶液,但当溶液性质复杂时,设备的移液性能可能会发生显著变化。当处理水基试剂时,多种方法可用于校准/验证系统得移液性能(包括光度法和重量法)。然而,当处理复杂和/或非水试剂(如二甲基亚砜、血清、含洗涤剂的水基混合物等)时,公认的移液系统验证方法较少。利用 MVS,可以利用与待移液样品相似的标准液对移液系统进行验证, MVS 提供基于 DMSO、血清、PCR预混液等多种标准液,从而校准移液设备对非水基、复杂溶液的移取体积的准确性。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招

不同基质的测试液


该图显示了用水基标准液校准后的 MVS 用于移液器的验证,分别移取 8 μl 三种不同基质溶液的相对不准确性 % 和 CV % 。三种溶液分别是 (a) 90% 的二甲基亚砜 (DMSO) ;(b) 20% 甘油,(c) 50% 乙醇。


11

操作员/操作程序考核:MVS 还用于比较不同操作人员操作的移液性能,以及比较不同操作员编写的移液方法(软件脚本)的移液性能。当相同的实验操作手册在不同的实验室由不同的操作人员平行运行或每天运行时,MVS 可以帮助减少分析方法开发中的潜在错误。MVS 可以帮助培训操作人员使用正确的移液技术,使移液体积在特定的容差窗口内。


12

现场验收测试和预防性维护前、后测试:MVS 可以在安装新的液体设备期间或之后使用,以立即验证系统的性能。此外,它可以在现场服务前后使用,记录和验证性能的变化和调整。


13

保证逐级稀释精度:MVS 可用于评估采用移液设备进行稀释步骤的准确性。在 96 孔或 384 孔板中,MVS 能够测量到逐步稀释至起始材料的 1/2048。用户定义每个稀释步骤的精度公差限制。


保证多通道移液设备的移液体积准确&可重复性的绝招


14

MVS 集成到工艺中的质量控制:MVS 可以集成到移液工作站,以实现更加自动化的体积验证。性能数据(每个移液喷头和每个孔)也可以以 XML 格式导出到公司的 LIMS 系统,以便完全控制验证过程。


15

成组测试板的批处理功能:用户可以通过存储板和溶液的条形码将体积验证的测试组简化为一种方法。消除在不同验证事件之间连续扫描条形码。


16

确定分析实验的公差:使用 MVS,您可以了解液体处理可变性对分析检测的影响,以及产生可接受的检测结果的移液体积偏差范围。通过调整和修改移液参数(随后使用 MVS 进行体积验证),可以简单地根据转移体积的准确性(注意,分析物浓度与体积有关)确定合格/不合格检测结果之间的直接相关性。



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Advanced Instruments成立于1955年,总部位于美国马萨诸塞州诺伍德,60 多年来一直致力于帮助生物制药,临床及食品饮料行业客户提升测试结果的质量,实现可信赖的实验结果,并不断提高企业的生产效率。


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