超微量分光光度计与蛋白质检测那点事

超微量分光光度计是实验室里常见仪器，常被用于检测核酸的浓度和纯度，那么它在蛋白质检测上的应用呢？

常用的蛋白质吸收波长为280nm，其他常见的显色法蛋白质检测所需要的波长为562nm、595nm、650nm等。Microdrop系列超微量分光光度计的检测波长范围为185-910nm，可以覆盖大部分实验所需情况，并且内置了直接检测、BCA法、Bradford法、Lowry法等共6种可选计算方法，其基座模式能够检测0.5-2μL的样本，大大节约了样本的消耗。

但是在实际使用中，不时会有一些小伙伴发现，检测出来的结果不准确、不稳定，这是为什么呢？

影响检测结果的因素是——样本量。虽然基座检测时样本的量不是特别关键，但是必须保证两根光纤之间形成完整的液柱，这样才能保证两根光纤之间形成样本液柱，使得我们的光信号能够完整通过样本并回流到检测器中。

要使样本液滴能够顺利地被拉出液柱，需要保证液滴具有足够大的表面张力，决定液滴表面张力的主要因素是溶液中水分子的氢键结合力。通常情况下，溶液中所有的溶质（蛋白，DNA，RNA，盐离子，去垢剂分子等）都会对表面张力产生影响，总的来说纯化获得的蛋白质溶液通常表面张力会较低，当样本量不足时很可能无法正常行车液柱。

因此，我们建议，在进行纯蛋白、Bradford，BCA，Lowry或者蛋白Pierce 660nm试验时，适当增加上样量至2μL，能够有效帮助液柱形成，提高最终检测结果的准确和精确性。