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赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测

我国鸭养殖数量位居世界首位近年来鸭的疫病日益增多生产和使用的鸭源生物制品种类越来越多。外源病毒检验是病毒类活疫苗质量控制项目之一对保证产品质量至关重要。

赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测

根据GB/T 41698-2022,鸭源生物制品外源病毒的检测有:鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒Ⅰ型、鸭坦布苏病毒、番鸭细小病毒、番鸭小鹅瘟病毒的鸭源生物制品外源病毒检测。以下简述鸭瘟病毒的检测方法:

1.加样与孵育取抗原包被板分别将阴性对照血清、鸭瘟病毒阳性对照血清和稀释好的待检血清加到抗原包被板孔中2孔100μL/孔轻轻振匀孔中样品用封板膜密封包被板37℃孵育1h。

2.洗涤去除封板膜弃去孔中液体,用Miragen电动移液器每孔加300μL洗涤液作用3min弃去洗涤液重复洗涤3次。可用洗板机或手动洗涤。

赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测

3.与鸭瘟病毒单克隆抗体作用:用Miragen电动移液器每孔加鸭瘟病毒单克隆抗体100μL用封板膜密封包被板37 ℃孵育1h。

4.洗涤2中方法洗涤。

5.与酶标抗体作用:用Miragen电动移液器每孔加入羊抗鼠酶标抗体100μL用封板膜密封包被板37℃孵育1h。

6.洗涤2中方法洗涤。

7.显色:用Miragen电动移液器每孔中加入TMB底物溶液100μL轻摇2s20℃~25 ℃下避光显色10 min

赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测

8.终止:用Miragen电动移液器每孔加入终止液50μL置酶标仪在OD450nm 波长下测定各孔OD值。

9.试验成立条件当阴性血清对照孔平均OD450nm值大于或等于0.8且阳性对照孔的阳断率(PD)大于或等于50%判定检测结果有效。

赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测

以上实验涉及多次小体积液体移取,实验室移取小体积(几微升到10毫升)的液体,一般采用移液器。Miragen电动移液器,数值靠设定或选定,电机控制活塞运动,吸液和排液也更加稳定,还有步骤少、调数快、模式多等诸多优势。Miragen电动移液器可给电机多段信号,从而达到吸液和排液分次且各体积独立可调。比如上面的标准溶的移取,就可设置单吸多排(如吸200uL,排2次,每次100uL),程序可存储和调用,非常便捷。


来源于:北京翰百赫仪器有限公司(德国赫施曼中国技术服务中心)

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我国鸭养殖数量位居世界首位近年来鸭的疫病日益增多生产和使用的鸭源生物制品种类越来越多。外源病毒检验是病毒类活疫苗质量控制项目之一对保证产品质量至关重要。

赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测

根据GB/T 41698-2022,鸭源生物制品外源病毒的检测有:鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒Ⅰ型、鸭坦布苏病毒、番鸭细小病毒、番鸭小鹅瘟病毒的鸭源生物制品外源病毒检测。以下简述鸭瘟病毒的检测方法:

1.加样与孵育取抗原包被板分别将阴性对照血清、鸭瘟病毒阳性对照血清和稀释好的待检血清加到抗原包被板孔中2孔100μL/孔轻轻振匀孔中样品用封板膜密封包被板37℃孵育1h。

2.洗涤去除封板膜弃去孔中液体,用Miragen电动移液器每孔加300μL洗涤液作用3min弃去洗涤液重复洗涤3次。可用洗板机或手动洗涤。

赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测

3.与鸭瘟病毒单克隆抗体作用:用Miragen电动移液器每孔加鸭瘟病毒单克隆抗体100μL用封板膜密封包被板37 ℃孵育1h。

4.洗涤2中方法洗涤。

5.与酶标抗体作用:用Miragen电动移液器每孔加入羊抗鼠酶标抗体100μL用封板膜密封包被板37℃孵育1h。

6.洗涤2中方法洗涤。

7.显色:用Miragen电动移液器每孔中加入TMB底物溶液100μL轻摇2s20℃~25 ℃下避光显色10 min

赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测

8.终止:用Miragen电动移液器每孔加入终止液50μL置酶标仪在OD450nm 波长下测定各孔OD值。

9.试验成立条件当阴性血清对照孔平均OD450nm值大于或等于0.8且阳性对照孔的阳断率(PD)大于或等于50%判定检测结果有效。

赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测

以上实验涉及多次小体积液体移取,实验室移取小体积(几微升到10毫升)的液体,一般采用移液器。Miragen电动移液器,数值靠设定或选定,电机控制活塞运动,吸液和排液也更加稳定,还有步骤少、调数快、模式多等诸多优势。Miragen电动移液器可给电机多段信号,从而达到吸液和排液分次且各体积独立可调。比如上面的标准溶的移取,就可设置单吸多排(如吸200uL,排2次,每次100uL),程序可存储和调用,非常便捷。