用于食醋酿造及产酸和纤维素酶的沃氏葡萄球菌

                   用于食醋酿造及产酸和纤维素酶的沃氏葡萄球菌

沃氏葡萄球菌是Staphylococcus属的微生物，原产地为中国。革兰阳性球菌，直径0.5~1.5μm，成单，双，短链或不规则葡萄状排列。主要用途为研究；分析检测，具体用途为致病菌检测芯片研发。

一、菌种简介

平台编号：Bio-090949

规格：冻干物

拉丁属名：Staphylococcus Warneri

中文名称：沃氏葡萄球菌

拉丁名称：Staphylococcus warneri

来源历史：←北京工商大学

收藏时间：2018/1/22

原始编号：B8#47.CS

原产国：中国

资源归类编码：15131315101

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究

特征特性：化能异养；嗜温；趋酸，好氧。CYC琼脂37℃培养2天， 菌落呈圆形，乳白色 ，表面光滑，湿润。菌体球形，单个、成对或链状排列，革兰氏阳性。

具体用途：用于食醋酿造，产酸 、纤维素酶。

生物危害程度：四类

培养基编号：CM0002

培养基名称：营养肉汁琼脂

培养基成分：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。

培养温度：37℃

需氧类型：好氧

分离基物：山西老陈醋醋醅

采集地：中国河北省定州市

保存方法：-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

提供形式：冻干物

用途：用于食醋酿造，产酸 、纤维素酶。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、培养条件

1、培养基：营养肉汁琼脂

2、培养基配方：牛肉膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。121℃，15min。

3、培养温度：37℃

4、培养时间：24-48h

三、培养方法

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

四、实验内容

1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2、干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3、高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4、过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

五、培养注意事项

1、冻干首次活化，干粉要全部用完，不能保留，参考“开管说明”用无菌吸管吸取0.3ml~0.5ml的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解，吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过2支斜面或平板；若接种液体培养基，则试管中液体培养基不超过5ml为宜） ；

2、复苏后，微生物菌种应保藏于建议的温度、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退。

3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，百欧博伟生物不负责任。

4、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

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