迪马科技优化辣椒红色素中苏丹红的测定

    苏丹红是一种人工合成的染料，并非食品添加剂，其结构为亲脂性偶氮化合物，主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四种类型。如果食品中的苏丹红含量较高，达上千毫克，则苏丹红诱发动物肿瘤的机会就会上百倍增加，特别是苏丹红有些代谢产物是人类可能的致癌物。
    早在2003年5月，法国发现从印度进口的红辣椒产品中含有苏丹红Ⅰ号。随后，在欧盟成员国加强检测后，又在包括咖喱粉在内的一系列进口辣椒产品中发现了苏丹红Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号。2005年2月，英国食品标准局在英国“第一食品公司” 制造的伍斯特郡辣酱油使用的辣椒粉中查出了苏丹红Ⅰ号，并于2月下旬，向全球发出十五项安全警告。随后，我国也加强了苏丹红Ⅰ~Ⅳ号的检测工作，发布了《GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法 高效液相色谱法》国家标准。
    迪马科技一直致力于为食品安全检测提供完善的服务，面对苏丹红事件层出不穷，迪马科技在参考国标的基础上开发出辣椒红色素中苏丹红的检测方法。样品经乙腈两次提取后旋转蒸发至干，正己烷溶解，然后使用ProElut Silica 固相萃取柱进行净化，高效液相色谱法检测。相比较于国标方法前处理过程更加简便，色谱分析条件优化后分析时间更短，10分钟内即可实现四种苏丹红的完全分离。
    下面为详细解决方案，敬请参考！

1. 样品准备/提取

1. 称取0.1 g~0.2 g样品于离心管中，加入10 mL乙腈；
2. 涡旋混合5 min，超声提取5 min，6000 rpm下离心3 min，收集上清液；
3. 残渣再用10 mL乙腈提取，每次涡旋混合5 min，超声提取5 min ，6000 rpm下离心3 min；合并两次提取液；
4. 在40 ℃下用减压蒸馏将提取液蒸干，然后用5 mL正己烷溶解，待净化。

2. SPE柱净化——ProElut Silica 1 g/6 mL（Cat.#：63006）

(1)活    化：	10 mL正己烷，流出液弃去；
(2)上    样：	将待净化液加入小柱，流出液弃去；
(3)洗    脱：	15 mL乙醚：乙腈=1：9洗脱，收集流出液；
(4)重新溶解：	在40 ℃下用减压蒸馏将收集的流出液蒸干，然后用乙腈定容至2 mL后供HPLC分析。

3 分析条件

色谱柱：	Diamonsil C8(2)  150×4.6 mm，5 μm（Cat.#：99650）
流  速：	1.0 mL/min
检测器：	UV：478 nm
柱  温：	30 ℃
进样量：	20 μL
流动相：	A：乙腈，B：水

梯度

时间（min）	0	5	5.01	15
A（%）	85	90	85	85
B（%）	15	10	15	15

 
4 添加回收结果
辣椒油中苏丹红的添加回收结果
 

目标物	苏丹红Ⅰ	苏丹红Ⅱ	苏丹红Ⅲ	苏丹红Ⅳ
回收率	94.47%	93.44%	90.80%	92.12%

辣椒红色素中苏丹红的测定相关产品信息：

货号	名称	规格
样品前处理
63006	硅胶萃取柱ProElut Silica	1 g/6 mL, 30/pk
244358	12管防交叉污染真空SPE萃取装置	12位
4803	1,3,6mL柱管通用连接器	15/pk
4806	考克(控制流量)	15/pk
99011	真空/正压两用泵，无油	1/pk
99013	抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞)	1/pk
37177	针头式过滤器 Nylon	13 mm,0.22 μm 100/pk
37180	针头式过滤器 Nylon	13 mm,0.45 μm 100/pk
色谱柱及保护柱
99650	反相高效液相色谱柱  Diamonsil C8(2)	150 × 4.6 mm，5 μm
6202	EasyGuard C8 保护柱套装	10 × 4.0 1个柱套 + 2个柱芯
标准品
50P-C16986101	苏丹红Ⅰ[842-07-9]	250 mg
50P-C16986102	苏丹红Ⅱ[3118-97-6]	250 mg
50P-C16986103	苏丹红Ⅲ[85-86-9]	250 mg
50P-C16986104	苏丹红Ⅳ[85-83-6]	250 mg
HPLC溶剂Ÿ缓冲盐Ÿ离子对试剂
50101	乙腈 HPLC级	4 L
50115	正己烷 HPLC级	4 L
通用色谱产品
52401B	瓶架/蓝色	50 孔
52401A	瓶架/白色	50孔
5323	样品瓶（棕色/螺纹）	2 mL, 100/pk
5325	样品瓶盖/含垫（已经组装）	100/pk
H80465	HPLC 进样针	25 μL