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沙门氏菌的快速检验方法
1 适用范围:可用于各类食品和原料中沙门氏菌的定性和初筛检测。以及突发事件应急检测需要。
2 方法原理:将选择性培养基中加入专一性的辛酯酶显色剂,并将其加载在纸片上,通过培养,如果样品中含有沙门氏菌,即可在纸片上呈紫红色的菌落。
3 操作方法
3.1样品处理:无菌称取待测样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,经充分振摇或置均质器中做成1:10的样品匀液。
3.2接种:将测试片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个样品接种两片。
3.3培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中,堆叠片数不超过12片,透明面朝上水平置于恒温培养箱内。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
3.4结果观察:对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为沙门氏菌;呈蓝色的菌落为其他大肠菌,葡萄球菌不生长。
4 附加说明
4.1有关验证试验表明,测试片具有较强的敏感性,在1.5×10-8稀释时仍可检出菌落。临床实际应用结果显示阳性检出率高于分离培养法1.84‰,复查准确率提高约13.0%(中国卫生检验杂志2006, 16(8):954-955)。
4.2 本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测,用取样棉签涂抹被测物体表面,放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中,摇晃10s,然后取1mL接种到测试片上。
4.3注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。