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本试剂盒用于定量检测鱼类组织中的三苯甲烷类染料含量(隐性孔雀石绿,孔雀石绿和隐形结晶紫)
背景
孔雀石绿是一种三甲苯烷类染料,它可抗真菌和原虫感染,从而被广泛应用于水产养殖业。据报道,孔雀石绿的毒性随着光照的时间,温度和强度增加而增强。它具有致癌性、致突变性、致染色体断裂、致畸性和呼吸系统毒性。因为孔雀石绿高效的抗菌作用和没有其他等效产品替代导致其滥用。孔雀石绿很容易被鱼类吸收并被代谢为一种无色的化合物——隐性孔雀石绿(隐性孔雀石绿在高脂肪鱼类组织中长时间残留)。
本试剂盒可以快速,准确地检测隐性孔雀石绿,孔雀石绿和隐性结晶紫含量,也可以用于筛选三甲苯烷类染料是否存在。整个检测过程不超过2.5 小时(不包括样品制备和试剂准备过程)。如果进行复样检测,可以最多检测40个样品。
原理
试剂盒提供的微孔板上的微孔预包被了隐性孔雀石绿抗体。标准品中的三甲苯烷类染料即抗原和样品中的抗原分别与酶标记结合物(酶标记隐性孔雀石绿,酶标记抗原)同时竞争包被抗体上的有限结合位点,形成抗体/抗原、抗体/酶标记抗原复合物。室温孵育,使竞争反应完全。洗涤酶标板,除去游离的反应物。加入底物,在室温下,酶标记结合物上的辣根过氧化物酶催化底物发生显色反应,孵育一定时间使颜色发生最大变化。加入终止液使反应终止,同时反应物颜色由蓝转黄。颜色的深度与标准品/样品中的隐性孔雀石绿含量成反比,使用酶标仪在450 n m波长下读取相应的吸光度值。构建标准曲线,计算样品中隐性孔雀石绿浓度。