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Cytiva(思拓凡)
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PI3激酶在调节许多细胞过程中起关键作用,包括细胞增殖、存活、运动和代谢等。活化的PI3激酶能使蛋白激酶B激活,进而通过一系列细胞信号通路诱导细胞癌变。当前,寻找PI3激酶的抑制剂已成为很多研究者的关注重点。

研究表明,大多数肌醇头部基团PI(3)P同样需要第三类PI3激酶的活力才能维持,而PI(3)P又能特异性地与FYVE-finger(一种富含半胱氨酸的结构域)结合,因此可把FYVE结构域报告蛋白作为第三类PI3激酶的传感器进行研究。

该方法使用的EGFP-2×FYVE融合蛋白由串联重复的FYVE-finger组成,这些FYVE-finger来自受肝细胞生长因子调节的酪氨酸激酶底物(Hrs)的人类同源体。该方法可用于活细胞筛选分析,以定量测定当给予稳定转染了EGFP-2×FYVE融合蛋白的U-2 OS细胞需要测试的化合物时,EGFP-2xFYVE融合蛋白从早期内涵体中结合PI(3)P的最初位置转运至细胞质中的变化,进而判定该化合物对PI3激酶的抑制效果。

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