产品详情
真核细胞蛋白裂解液实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。真核细胞蛋白裂解液小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
真核细胞蛋白裂解液注意
1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。
3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
真核细胞蛋白裂解液其它产品信息:
xy-E11223 人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)ELISA试剂盒
xy-E11224 人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA试剂盒
xy-E11225 人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)ELISA试剂盒
xy-E11226 人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA试剂盒
xy-E11227 人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)ELISA试剂盒
xy-E11228 人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA试剂盒
xy-E11229 人孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒
xy-E11230 人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒
xy-E11231 人基质裂解素(ST2)ELISA试剂盒
xy-E11232 人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒
xy-E11233 人脂氧素A4(LXA4)ELISA试剂盒
xy-E11234 人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体(PR3-ANCA)ELISA试剂盒
xy-E11235 人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒
xy-E11236 人脂磷壁酸(LTA)ELISA试剂盒
xy-E11237 人乙胺碘呋酮(AD)ELISA试剂盒
xy-E11238 人唾液酸(SA)ELISA试剂盒
xy-E11239 人鞘磷脂(SM)ELISA试剂盒
xy-E11240 人尿游离皮质醇(UFC)ELISA试剂盒
xy-E11241 人硫酸软骨素(CS)ELISA试剂盒
xy-E11242 人硫酸皮肤素(DS)ELISA试剂盒
xy-E11243 人硫酸类肝素(HS)ELISA试剂盒
xy-E11244 人硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒
xy-E11245 人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒
xy-E11246 人迟现抗原4(VLA4)ELISA试剂盒
xy-E11247 人吖啶橙(AO)ELISA试剂盒
xy-E11248 人甲胺喋呤(MTX)ELISA试剂盒
xy-E11249 人对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒