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RIPA裂解液 实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。RIPA裂解液 小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
RIPA裂解液 注意
1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。
3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
RIPA裂解液 其它产品信息:
xy-E11250 人苯丙氨酸(LPA)ELISA试剂盒
xy-E11251 人免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒
xy-E11252 人β萘酚(β-Nph)ELISA试剂盒
xy-E11253 人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒
xy-E11254 人α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒
xy-E11255 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒
xy-E11256 人α2纤溶酶抑制物(α2-PI)ELISA试剂盒
xy-E11257 人烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA试剂盒
xy-E11258 人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)ELISA试剂盒
xy-E11259 人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA试剂盒
xy-E11260 人芳香烃受体(AhR)ELISA试剂盒
xy-E11261 人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA试剂盒
xy-E11262 人促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA试剂盒
xy-E11263 人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA试剂盒
xy-E11264 人抗鼠抗体(HAMA)ELISA试剂盒
xy-E11265 人钙离子通道抗体(VGCC)ELISA试剂盒
xy-E11266 人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒
xy-E11267 人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒
xy-E11268 人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA试剂盒
xy-E11269 人阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒
xy-E11270 人不对称二甲基精氨酸(ADMA)ELISA试剂盒
xy-E11271 人血清素/血清胺(ST)ELISA试剂盒
xy-E11272 人细胞毒素(CTX)ELISA试剂盒
xy-E11273 人α突触核蛋白(α-SYN)ELISA试剂盒