产品详情
柱式粪便DNAout试剂盒实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。柱式粪便DNAout试剂盒小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
柱式粪便DNAout试剂盒注意
1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。
3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
柱式粪便DNAout试剂盒其它产品信息:
CCC-HBE-2 人胚气管组织来源细胞
CCC-HEK-1 人胚肾二倍体细胞
CCC-HEL-1 人胚肝二倍体细胞
CCC-HHM-2 人胚心肌组织来源细胞
CCC-HIE-2 人胚肠粘膜组织来源细胞
CCC-HPE-2 人胚胰腺组织来源细胞
CCC-SMC-1 兔主动脉平滑肌细胞
293001A Sars蛋白表达株
293001B Sars蛋白表达株
293sars181A Sars蛋白表达株
A-204 人横纹肌肉瘤
A375 人皮肤黑色素瘤细胞
A431 人皮肤基底细胞癌
A549 人肺癌细胞
A875 人黑色素瘤细胞
BeWo 人胎盘绒毛癌细胞
BGC-823 人胃腺癌细胞
BT474 人乳腺导管瘤
CACO-2 人结肠癌细胞
CaLu-3 人肺腺癌细胞
CASKI, 人宫颈癌
Colo205 人结肠癌
Colo320DM 人结肠癌
D341 Med 人髓母细胞瘤
Daudi 人B淋巴细胞瘤
DU145 人前列腺癌细胞
G-401 人肾癌Wilms
GLC-82 人肺腺癌细胞