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TAE缓冲液实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。TAE缓冲液小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
TAE缓冲液注意
1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。
3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
TAE缓冲液其它产品信息:
盐酸育亨宾 A0471 Yohimbine Hydrochloride
烟碱 A0472 Nicotine
金雀花碱(野靛碱) A0473 Cytisine
秋水仙碱 A0474 Colchicine
薯蓣皂苷元 A0475 Diosgenin
薯蓣皂苷 A0476 Dioscin
原薯蓣皂甙 A0477 Protodioscin
蛇床子素 A0478 Osthole
麝香酮 A0479 Muscone
山奈酚 A0480 Kaempferol
水杨苷 A0481 Salicin
水飞蓟宾 A0482 Silymarin
芸香柚皮苷 A0483 Narirutin
芍药苷 A0484 Paeoniflorin
鼠李糖 A0485 Rhamnose
甜菜碱 A0486 Betaine
盐酸甜菜碱 A0487 Betaine hydrochloride
甜菊苷 A0488 Stevioside
天麻素 A0489 Gastrodin
熊果酸 A0490 Ursolic acid
熊果苷 A0491 Arbutin
辛弗林 A0492 Synephrine
香豆素 A0493 Coumarin
对香豆酸 A0494 p-Coumaric acid
延胡索乙素 A0495 Tetrahydropalmatine
淫羊藿苷 A0496 Icariin
柚皮苷 A0497 Naringin
柚皮素 A0498 Naringenin
原花青素 A0499 Proanthocyanidins
岩白菜素 A0500 Bergenin
盐酸青藤碱 A0501 Sinomenine
盐酸小檗碱(黄连素) A0502 Berberine hydrochloride
小檗碱(硫酸黄连碱) A0503 Berberine
黄连碱 A0504 Coptisine
盐酸黄连碱 A0505 coptisine chloride
胡黄连苷-Ⅰ A0506 Picroside-Ⅰ
胡黄连苷-Ⅱ A0507 Picroside-Ⅱ
胡黄连苷-Ⅲ A0508 Picroside-Ⅲ
(+)-儿茶素 A0509 (+)-Catechin Hydrate
表没食子儿茶素没食子酸酯 A0510 EGCG
表儿茶素没食子酸酯 A0511 ECG
表没食子儿茶素(EGC) A0512 Epigallocatechin
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