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miRNA电泳上样液 实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。miRNA电泳上样液 小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
miRNA电泳上样液 注意
1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。
3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
miRNA电泳上样液 其它产品信息:
人黑素瘤缺乏因子1(AIM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
烟酸酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NAADP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
小鼠铜离子转运ATP酶β肽(ATP7β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人TNF受体关联因子3(TRAF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人TNF受体关联因子5(TRAF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人Toll样受体衔接分子1(TICAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人TANK结合激酶1(TBK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人V-Maf肌肉腱膜纤维肉瘤癌基因同源物(MAF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人白介素18结合蛋白(IL18BP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人早期内体抗原1(EEA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人多萜醇磷酸-N-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶1(DPAGT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人DNA损伤诱导转录因子3(DDIT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人H2A组蛋白家族成员V(H2AFV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人B-细胞κ-轻肽基因增强子抑制因子激酶β(IκBKβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人Snail同源物1(SNAI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
小鼠神经调节素4(NRG4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人含Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂域蛋白1(KAZALD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
大鼠棘皮动物微管关联蛋白样蛋白2(EML2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
大鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
马血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
马干扰素γ(IFNγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)