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人神经上皮瘤细胞 SH-SY5Y细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.人神经上皮瘤细胞 SH-SY5Y细胞
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核人神经上皮瘤细胞 SH-SY5Y细胞呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
HZB222Ra 大鼠突触核蛋白α(SNCα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Synuclein Alpha (SNCa)
HZG377Ra 大鼠钙离子转运ATP酶B2(ATP2B2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for ATPase, Ca++ Transporting, Plasma Membrane 2 (ATP2B2)
HZA433Ra 大鼠蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protein Kinase C Delta (PKCd)
CEA506Ra 大鼠D-二聚体(D2D)ELISA试剂盒 ELISA Kit for D-Dimer (D2D)
HZC133Ra 大鼠ⅩⅨ型胶原(COL19)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type XIX (COL19)
HZA127Ra 大鼠蛋白酶激活受体4(PAR4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protease Activated Receptor 4 (PAR4)
HZB726Ra 大鼠CD163分子(CD163)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation (CD163)
HZA864Ra 大鼠淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Amyloid Beta Peptide 1-40 (Ab1-40)
HZB954Ra 大鼠单氨氧化酶A(MAOA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Monoamine Oxidase A (MAOA)
HZE413Ra 大鼠钠/氢交换因子3(NHE3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sodium/Hydrogen Exchanger 3 (NHE3)
HZE396Ra 大鼠牛磺酸转运蛋白(TAUT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Taurine Transporter (TAUT)
HZH538Ra 大鼠NFKB激活蛋白(NKAP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for NFKB Activating Protein (NKAP)
HZD960Ra 大鼠雌激素受体相关受体α(ERRα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Estrogen Related Receptor Alpha (ERRa)
HZE798Ra 大鼠核受体共激活因子3(NCOA3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Nuclear Receptor Coactivator 3 (NCOA3)人神经上皮瘤细胞 SH-SY5Y细胞
HZE387Ra 大鼠高亲和力胆碱转运蛋白(ChT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for High Affinity Choline Transporter (ChT)
CEB216Ra 大鼠松弛肽(RLN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Relaxin (RLN)
HZB286Ra 大鼠乳脂球表皮生长因子8(MFGE8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8)
HZB742Ra 大鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for UDP Glucose Ceramide Glucosyltransferase (UGCG)
HZF598Ra 大鼠转移关联蛋白2(MTA2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Metastasis Associated Protein 2 (MTA2)
HZD949Ra 大鼠RAR相关孤儿素受体γ(RORγ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for RAR Related Orphan Receptor Gamma (RORg)
HZA807Ra 大鼠岩藻糖苷酶αL1(FUCα1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1)
CEA242Ra 大鼠摄食抑制因子1(NES1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Nesfatin 1 (NES1)
CEA819Ra 大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)
HZB388Ra 大鼠中性粒细胞明胶酶关联脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL)
HZA450Ra 大鼠激肽释放酶4(KLK4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kallikrein 4 (KLK5)
CEA686Ra 大鼠Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTXⅡ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cross Linked C-Telopeptide Of Type II Collagen (CTXII)
HZB952Ra 大鼠组蛋白乙酰基转移酶1(HAT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Histone Acetyltransferase 1 (HAT2)
HZC350Ra 大鼠末端补体复合体C5b-9(C5b-9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Terminal Complement Comp