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人神经母细胞瘤细胞 M,BE(2)-M17细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.人神经母细胞瘤细胞 M,BE(2)-M17细胞
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染人神经母细胞瘤细胞 M,BE(2)-M17细胞料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人神经母细胞瘤细胞 M,BE(2)-M17细胞
HZA889Mu 小鼠肾素(REN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Renin (REN)
HZA389Mu 小鼠补体成分4a(C4a)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 4a (C4a)
HZA796Mu 小鼠神经肽S(NPS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neuropeptide S (NPS)
HZA599Mu 小鼠颗粒酶A(GZMA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Granzyme A (GZMA)
HZA600Mu 小鼠颗粒酶B(GZMB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Granzyme B (GZMB)
HZA601Mu 小鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO)
HZA602Mu 小鼠过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peroxisomal Biogenesis Factor 2 (PEX2)
HZA180Mu 小鼠Ⅳ型胶原(COL4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type IV (COL4)
HZA356Mu 小鼠组蛋白H2B(H2B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Histone H2B (H2B)
HZA791Mu 小鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Osteonectin (ON)
HZA611Mu 小鼠血小板反应蛋白(THBS1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thrombospondin 1 (THBS1)
HZA615Mu 小鼠纤溶抑制因子(TAFI)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI)
HZA616Mu 小鼠V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog A (RELA)
HZA786Mu 小鼠纤维胶凝蛋白1(FCN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ficolin 1 (FCN1)
HZB859Mu 小鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lectin Like Oxidized Low Density Lipoprotein Receptor 1 (LOX1)
HZA620Mu 小鼠解整合素金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 8 (ADAM8)
HZA780Mu 小鼠乳铁传递蛋白(LTF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lactoferrin (LTF)
HZA624Mu 小鼠肝癌源性生长因子(HDGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hepatoma Derived Growth Factor (HDGF)
HZA627Mu 小鼠胱天蛋白酶9(CASP9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Caspase 9 (CASP9)
HZA629Mu 小鼠BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)ELISA试剂盒 ELISA Kit for BH3 Interacting Domain Death Agonist (Bid)
HZA776Mu 小鼠丙酮酸脱氢酶α(PDHα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)
HZA775Mu 小鼠己糖激酶1(HK1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1)
HZA637Mu 小鼠氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb)
HZA635Mu 小鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Factor H (CFH)
CEA634Mu 小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Trypsinogen Activation Peptide (TAP)
HZA638Mu 小鼠内脂素(VF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Visfatin (VF)
HZB214Mu 小鼠天冬氨酸转氨酶(AST)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aspartate Aminotransferase (AST)
HZC030Mu 小鼠脑型肌酸激酶(CKB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Creatine Kinase, Brain (CKB)
HZB209Mu 小鼠颗粒酶K(GZMK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Granzyme K (GZMK)
HZA693Mu 小鼠27kDa热休克蛋白(HSPB1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Heat Shock 27kDa Protein 1 (HSPB1)
CEA639Mu 小鼠Ⅰ型胶原交联氨基端肽(NTXⅠ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cross Linked N-Telopeptide Of Type I Collagen (NTXI)
HZA116Mu 小鼠调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Regulated On Activation In Normal T-Cell Expressed And Secreted (RANTES)
HZA646Mu 小鼠骨形成蛋白6(BMP6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)
HZA979Mu 小鼠亲环素A(CYPA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cyclophilin A (CYPA)