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人神经母细胞瘤细胞 IMR-32细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法人神经母细胞瘤细胞 IMR-32细胞.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 3人神经母细胞瘤细胞 IMR-32细胞3342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
HZA207Mu 小鼠谷丙转氨酶(ALT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alanine Aminotransferase (ALT)
CEA991Mu 小鼠饥饿素(GHRL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ghrelin (GHRL)
HZA223Mu 小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1RA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA)
CEB396Ge 血栓素A2(TXA2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thromboxane A2 (TXA2)
HZB434Ra 大鼠蛋白酶3(PR3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Proteinase 3 (PR3)
CEA448Mu 小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin (INS)
HZA449Mu 小鼠胱天蛋白酶7(CASP7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Caspase 7 (CASP7)
HZA450Mu 小鼠激肽释放酶4(KLK4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kallikrein 4 (KLK4)
HZA212Mu 小鼠基质金属蛋白酶23B(MMP23B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B)
HZA215Mu 小鼠Ⅰ型胶原α2(COL1α2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 2 (COL1a2)
HZA702Mu 小鼠硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thioredoxin (Trx)
HZA703Mu 小鼠硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thioredoxin Reductase 1 (TrxR1)
CEA932Mu 小鼠孤啡肽(OFQ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Orphanin FQ (OFQ)
HZA933Mu 小鼠内凝集蛋白1(ITLN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Intelectin 1 (ITLN1)
HZA704Mu 小鼠载脂蛋白E(APOE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Apolipoprotein E (APOE)
HZA934Mu 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Alpha (PPARa)
CEA217Mu 小鼠α1-微球蛋白(α1M)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor (a1M)
HZA218Mu 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2)
HZA706Mu 小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制因子(Vaspin)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Visceral Adipose Tissue Derived Serine Protease Inhibitor (Vaspin)
HZA769Mu 小鼠肝脂酶(LIPC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lipase, Hepatic (LIPC)
HZA936Mu 小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1)
CEA220Mu 小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM)
HZA229Mu 小鼠白介素2受体β(IL2Rβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 2 Receptor Beta (IL2Rb)
HZA946Mu 小鼠淀粉样蛋人神经母细胞瘤细胞 IMR-32细胞
HZA672Mu 小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Slit Homolog 2 (Slit2)