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人神经胶质瘤细胞 BT-325细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态人神经胶质瘤细胞 BT-325细胞特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指人神经胶质瘤细胞 BT-325细胞标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期人神经胶质瘤细胞 BT-325细胞的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
HZA086Mu 小鼠L选择素(SELL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Selectin, Leukocyte (SELL)
HZA090Mu 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 1, Macrophage (MCSF)
HZA104Mu 小鼠胆囊收缩素A受体(CCKAR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR)
HZA105Mu 小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Nerve Growth Factor (NGF)
HZA106Mu 小鼠神经营养因子3(NT3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neurotrophin 3 (NT3)
HZA107Mu 小鼠神经营养因子4(NT4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neurotrophin 4 (NT4)
HZA108Mu 小鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Osteoprotegerin (OPG)
HZA109Mu 小鼠肌肌酸激酶(CKM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM)
HZA110Mu 小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Oncostatin M (OSM)
HZA113Mu 小鼠核糖核酸酶T2(RNASET2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ribonuclease T2 (RNASET2)
HZA118Mu 小鼠CD30配体(CD30L)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 30 Ligand (CD30L)
HZA119Mu 小鼠CD40配体(CD40L)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 40 Ligand (CD40L)
HZA120Mu 小鼠干细胞因子(SCF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF)
HZA124Mu 小鼠转化生长因子β1(TGFβ1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1)
HZA133Mu 小鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)
HZA134Mu 小鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Beta (TNFb)
HZA135Mu 小鼠血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thrombopoietin (TPO)
HZA158Mu 小鼠激活素AB(ACVAB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Activin AB (ACVAB)
HZA160Mu 小鼠α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)
HZA164Mu 小鼠泛素(Ub)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ubiquitin (Ub)
HZA181Mu 小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Elastase 2, Neutrophil (ELA2)
HZA196Mu 小鼠半乳糖苷酶β(GLβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galactosidase Beta (GLb)
HZA208Mu 小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK)
HZA225Mu 小鼠心钠肽(ANP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP)
HZA235Mu 小鼠补体1抑制因子(C1INH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH)
HZA270Mu 小鼠T-细胞激活连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Linker For Activation Of T-Cell (LAT)
HZA222Mu 小鼠干扰素β(IFNβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb)
CEA441Mu 小鼠黄体激素(LH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Luteinizing Hormone (LH)
HZA447Mu 小鼠C-肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 ELISA Kit for C-Peptide
HZA451Mu 小鼠激肽释放酶5(KLK5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kallikrein 5 (KLK5)
HZA696Mu 小鼠二氢硫辛酸转乙酰基酶(DLAT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dihydrolipoyl Transacetylase (DLAT)
HZA569Mu 小鼠P选择素(SELP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Selectin, Platelet (SELP)