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人脐静脉血管内皮细胞 HUVEC(原代)细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜人脐静脉血管内皮细胞 HUVEC(原代)细胞
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫人脐静脉血管内皮细胞 HUVEC(原代)细胞描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人脐静脉血管内皮细胞 HUVEC(原代)细胞
HEA105Hu 人神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法,高敏) High Sensitive ELISA Kit for Nerve Growth Factor (NGF)
HZB139Hu 人抗利尿激素(ADH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH)
HZH292Hu 人妊娠特异性β1-糖蛋白2(PSG2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pregnancy Specific Beta-1-Glycoprotein 2 (PSG2)
HZA554Hu 人尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)
HZN863Hu 人Osterix蛋白(OSX)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Osterix (OSX)
HZD251Hu 人线粒体铁蛋白(FTMT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ferritin, Mitochondrial (FTMT)
HZE426Hu 人二价金属转运蛋白1(DMT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Divalent Metal Transporter 1 (DMT1)
HZH308Hu 人鱼精蛋白1(PRM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protamine 1 (PRM1)
HZH789Hu 人铁反应元件结合蛋白2(IREB2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Iron Responsive Element Binding Protein 2 (IREB2)
HZW786Hu 人柯萨奇病毒腺病毒受体样膜蛋白(CLMP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Coxsackie And Adenovirus Receptor Like Membrane Protein (CLMP)
HZL331Hu 人补体因子H相关蛋白5(CFHR5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Factor H Related Protein 5 (CFHR5)
HZN191Hu 人含半胱氨酸丰富分泌蛋白LCCL域蛋白2(CRISPLD2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cysteine Rich Secretory Protein LCCL Domain Containing Protein 2 (CRISPLD2)
HZA417Hu 人鞘磷脂脂质蛋白1(PLP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Proteolipid Protein 1, Myelin (PLP1)
HZA999Hu 人鞘磷脂蛋白0(MPZ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protein Zero, Myelin (MPZ)
HZB704Hu 人血型糖蛋白A(GYPA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glycophorin A (GYPA)
HZB861Hu 人丝切蛋白2(CFL2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cofilin 2, Muscle (CFL2)
HZC124Hu 人Smad同源物2(Smad2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 2 (Smad2)
HZC441Hu 人二肽酶1(DPEP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dipeptidase 1, Renal (DPEP1)
HZC681Hu 人去甲肾上腺素转运蛋白(NET)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Norepinephrine Transporter (NET)
HZC994Hu 人谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 4 (GPX4)
CED057Hu 人7-脱氢胆固醇(7-DHC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for 7-Dehydrocholesterol (7-DHC)
HZD470Hu 人芳香烃受体核转位因子(ARNT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator (ARNT)
HZD832Hu 人Ⅴ组磷脂酶A2(PLA2G5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Phospholipase A2, Group V (PLA2G5)
HZE723Hu 人τ-微管蛋白激酶2(tTBK2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tau-Tubulin Kinase 2 (tTBK2)