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人皮肤鳞癌细胞 A431细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细人皮肤鳞癌细胞 A431细胞胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特人皮肤鳞癌细胞 A431细胞异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人皮肤鳞癌细胞 A431细胞
(LPCAT3)
HZG610Hu 人芳基硫酸酯酶B(ARSB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Arylsulfatase B (ARSB)
HZG820Hu 人甘胺酸-N-甲基转移酶(GNMT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glycine-N-Methyltransferase (GNMT)
HZG919Hu 人尿苷二磷酸糖基转移酶8(UGT8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for UDP Glycosyltransferase 8 (UGT8)
HZG948Hu 人泛醌蛋白2(UBQLN2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ubiquilin 2 (UBQLN2)
HZG963Hu 人胸苷酸合成酶(TYMS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thymidylate Synthetase (TYMS)
HZH015Hu 人踝蛋白2(TLN2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Talin 2 (TLN2)
HZH033Hu 人转谷氨酰胺酶6(TGM6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transglutaminase 6 (TGM6)
HZH088Hu 人突触极蛋白2(SYNPO2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Synaptopodin 2 (SYNPO2)
HZH097Hu 人亚硫酸盐氧化酶(SUOX)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sulfite Oxidase (SUOX)
HZH108Hu 人硫酸酯酶1(SULF1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sulfatase 1 (SULF1)
HZH135Hu 人角鲨烯单加氧酶(SQLE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Squalene Epoxidase (SQLE)
HZH178Hu 人N-磺氨基葡糖磺基氢化酶(SGSH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for N-Sulfoglucosamine Sulfohydrolase (SGSH)
HZH234Hu 人核黄素激酶(RFK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Riboflavin Kinase (RFK)
HZH244Hu 人网钙蛋白2(RCN2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Reticulocalbin 2 (RCN2)
HZH366Hu 人丝束蛋白1(PLS1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Plastin 1 (PLS1)
HZH428Hu 人异戊烯半胱氨酸氧化酶1(PCYOX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Prenylcysteine Oxidase 1 (PCYOX1)
HZH578Hu 人NAD激酶(NADK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for NAD Kinase (NADK)
HZH582Hu 人肌原调节蛋白2(MYOZ2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myozenin 2 (MYOZ2)
HZH585Hu 人肌间蛋白2(MYOM2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myomesin 2 (MYOM2)
HZH590Hu 人生肌因子5(MYF5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myogenic Factor 5 (MYF5)
HZH609Hu 人亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Methylenetetrahydrofolate Reductase (MTHFR)
HZH673Hu 人苹果酸脱氢酶1(MDH1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Malate Dehydrogenase 1 (MDH1)
HZH755Hu 人犬尿氨酸-3-单加氧酶(KMO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kynurenine-3-Monooxygenase (KMO)
HZH816Hu 人白介素4诱导蛋白1(IL4I1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 4 Induced Protein 1 (IL4I1)
HZH884Hu 人Hornerin蛋白(HRNR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hornerin (HRNR)
HZH917Hu 人造血蛋白(HEMGN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hemogen (HEMGN)
HZH918Hu 人Hephaestin蛋白(HEPH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hephaestin (HEPH)