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人胶质瘤细胞 SKMG4细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了人胶质瘤细胞 SKMG4细胞许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.人胶质瘤细胞 SKMG4细胞
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固人胶质瘤细胞 SKMG4细胞定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
HZL617Hu 人胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3)
HZL763Hu 人黏病毒耐药蛋白1(MX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myxovirus Resistance 1 (MX1)
HZS158Hu 人酶原粒蛋白16同源物B(ZG16B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Zymogen Granule Protein 16 Homolog B (ZG16B)
HZT618Hu 人甘露糖受体C1样蛋白1(MRC1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)
HZB300Hu 人糖蛋白Ⅴ(GP5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glycoprotein V, Platelet (GP5)
HZC466Hu 人巢蛋白(NID)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Nidogen (NID)
HZC759Hu 人静止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1)
HZC196Hu 人连接桥粒斑珠蛋白(JUP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Junction Plakoglobin (JUP)
HZB160Hu 人抗增生抗体靶分子1(TAPA1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Target Of The Antiproliferative Antibody 1 (TAPA1)
HZP196Hu 人解整合素金属蛋白酶33(ADAM33)ELISA试剂盒 ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 33 (ADAM33)
HZG669Hu 人氯离子通道辅助蛋白1(CLCA1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chloride Channel Accessory 1 (CLCA1)
HZH142Hu 人丝氨酸肽酶抑制因子Kunitz型2(SPINT2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Serine Peptidase Inhibitor Kunitz Type 2 (SPINT2)
HZH669Hu 人NADP依赖性苹果酶2(ME2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Malic Enzyme 2, NADP+ Dependent, Mitochondrial (ME2)
HZE047Hu 人原钙黏素γA2(PCDHγA2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protocadherin Gamma A2 (PCDHgA2)
HZD016Hu 人心脏肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myosin Binding Protein C, Cardiac (MYBPC3)
HZL882Hu 人UL16结合蛋白2(ULBP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for UL16 Binding Brotein 2 (ULBP2)
HZL921Hu 人信号素4A(SEMA4A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Semaphorin 4A (SEMA4A)
HZM373Hu 人Tolloid样蛋白1(TLL1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tolloid Like Protein 1 (TLL1)
HZM893Hu 人含RNA结合冷休克域蛋白E1(CSDE1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)
HZP710Hu 人C-型凝集素域家族11成员A(CLEC11A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A)
HZQ421Hu 人丝氨酸蛋白酶23(PRSS23)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protease, Serine 23 (PRSS23)