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人急性早幼粒白血病细胞(悬浮)NB4细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒人急性早幼粒白血病细胞(悬浮)NB4细胞置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-人急性早幼粒白血病细胞(悬浮)NB4细胞T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人急性早幼粒白血病细胞(悬浮)NB4细胞
HZQ264Hu 人E1A激活基因阻遏子1(CREG1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cellular Repressor Of E1A Stimulated Genes 1 (CREG1)
HZC563Hu 人白细胞衍生趋化因子1(LECT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Leukocyte Cell Derived Chemotaxin 1 (LECT1)
HZE916Hu 人沉默调节蛋白6(SIRT6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sirtuin 6 (SIRT6)
HZB964Hu 人钙蛋白酶1(CAPN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Calpain 1, Large Subunit (CAPN1)
HZP574Hu 人线粒体外膜转位酶70A(TOMM70A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Translocase Of Outer Mitochondrial Membrane 70A (TOMM70A)
HZC195Hu 人分拣连接蛋白13(SNX13)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sorting Nexin 13 (SNX13)
HZE877Hu 人分拣连接蛋白17(SNX17)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sorting Nexin 17 (SNX17)
HZF589Hu 人微纤丝关联蛋白4(MFAP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Microfibrillar Associated Protein 4 (MFAP4)
HZL096Hu 人细胞程序性死亡蛋白6(PDCD6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 6 (PDCD6)
HZB247Hu 人细胞程序性死亡蛋白6相互作用蛋白(PDCD6IP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 6 Interacting Protein (PDCD6IP)
HZD294Hu 人细胞色素P450家族成员1A2(CYP1A2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cytochrome P450 1A2 (CYP1A2)
HZR877Hu 人C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9(C1QTNF9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for C1q And Tumor Necrosis Factor Related Protein 9 (C1QTNF9)
HZA516Hu 人角蛋白16(KRT16)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Keratin 16 (KRT16)
HZC082Hu 人层粘连蛋白γ1(LAMγ1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Laminin Gamma 1 (LAMC1)
HZC672Hu 人神经外营养蛋白1(NXPH1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neurexophilin 1 (NXPH1)
HZF710Hu 人肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅵ(PADI6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peptidyl Arginine Deiminase Type VI (PADI6)
HZB073Hu 人白介素12受体β2(IL2Rβ2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 12 Receptor Beta 2 (IL12Rb2)
HZP892Hu 人角蛋白81(KRT81)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Keratin 81 (KRT81)