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人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 CCRF-CEM细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 CCRF-CEM细胞同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 CCRF-CEM细胞质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 CCRF-CEM细胞
HZM435Hu 人甘油磷酸肌醇锚定高密度脂蛋白结合蛋白1(GPIHBP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glycosylphosphatidylinositol Anchored High Density Lipoprotein Binding Protein 1 (GPIHBP1)
HZL934Hu 人NEL样蛋白2(NELL2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for NEL Like Protein 2 (NELL2)
HZA522Hu 人角蛋白14(KRT14)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Keratin 14 (KRT14)
HZD864Hu 人谷氨酰胺果糖-6-磷酸转氨酶2(GFPT2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutamine Fructose-6-Phosphate Transaminase 2 (GFPT2)
HZD908Hu 人二肽基肽酶6(DPP6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 6 (DPP6)
HZH035Hu 人反式高尔基体网状结构蛋白2(TGOLN2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Trans Golgi Network Protein 2 (TGOLN2)
HZH773Hu 人内凝集蛋白2(ITLN2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Intelectin 2 (ITLN2)
HZK132Hu 人DnaJ/Hsp40同源物亚家族C成员12(DNAJC12)ELISA试剂盒 ELISA Kit for DnaJ/HSP40 Homolog Subfamily C, Member 12 (DNAJC12)
HZB562Hu 人杀伤细胞免疫球蛋白样受体3DL1(KIR3DL1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Killer Cell Immunoglobulin Like Receptor 3DL1 (KIR3DL1)
HZM012Hu 人节律昼夜蛋白1(PER1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Period Circadian Protein 1 (PER1)
HZQ116Hu 人Clock同源物(CLOCK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Clock Homolog (CLOCK)
HZC781Hu 人转胶蛋白(TAGLN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transgelin (TAGLN)
HZC407Hu 人隐花色素1(CRY1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cryptochrome 1 (CRY1)
HZH449Hu 人配对框基因9(PAX9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Paired Box Gene 9 (PAX9)
HZB377Hu 人髓细胞触发受体1(IREM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Immune Receptor Expressed On Myeloid Cells 1 (IREM1)
HZM611Hu 人POTE锚蛋白域家族成员G(POTEG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for POTE Ankyrin Domain Family, Member G (POTEG)
HZH544Hu 人Neudesin神经营养因子(NENF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neudesin Neurotrophic Factor (NENF)
HZB505Hu 人白介素3受体α(IL3Rα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 3 Receptor Alpha (IL3Ra)
HZD346Hu 人白介素17D(IL17D)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 17D (IL17D)
HZF709Hu 人肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅳ(PADI4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peptidyl Arginine Deiminase Type IV (PADI4)
HZB533Hu 人基质金属蛋白酶16(MMP16)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 16 (MMP16)
HZB430Hu 人信号素4D(SEMA4D)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Semaphorin 4D (SEMA4D)