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人急性淋巴母细胞白血病细胞 MOLT-4细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜人急性淋巴母细胞白血病细胞 MOLT-4细胞
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区人急性淋巴母细胞白血病细胞 MOLT-4细胞.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人急性淋巴母细胞白血病细胞 MOLT-4细胞
(PTPRG)
HZE343Hu 人兴奋性氨基酸转运蛋白1(EAAT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Excitatory Amino Acid Transporter 1 (EAAT1)
HZF506Hu 人驱动蛋白家族成员5A(KIF5A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kinesin Family, Member 5A (KIF5A)
HZF518Hu 人驱动蛋白家族成员18A(KIF18A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kinesin Family, Member 18A (KIF18A)
HZG045Hu 人G蛋白偶联雌激素受体1(GPER)ELISA试剂盒 ELISA Kit for G Protein Coupled Estrogen Receptor 1 (GPER)
HZC615Hu 人Bcl2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myeloid Cell Leukemia Sequence 1, Bcl2 Related (MCL1)
HZP389Hu 人IgG-Fc片段结合蛋白(FcγBP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fc Fragment Of IgG Binding Protein (FcgBP)
HZV122Hu 人序列相似家族132成员A(FAM132A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 132, Member A (FAM132A)
HZC483Hu 人形成素结合蛋白1(FNBP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Formin Binding Protein 1 (FNBP1)
HZC848Hu 人肌脂蛋白(SLN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sarcolipin (SLN)
HZD777Hu 人D-多巴色素变位酶(DDT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for D-Dopachrome Tautomerase (DDT)
HZC138Hu 人ⅩⅢ型胶原(COL13)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type XIII (COL13)
HZE593Hu 人泛素关联蛋白2(UBAP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ubiquitin Associated Protein 2 (UBAP2)
HZF558Hu 人尿溶蛋白3A(UPK3A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Uroplakin 3A (UPK3A)
HZK371Hu 人序列相似家族20成员A(FAM20A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 20, Member A (FAM20A)
HZC424Hu 人半胱氨酰白三烯受体1(CYSLTR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cysteinyl Leukotriene Receptor 1 (CYSLTR1)
HZP294Hu 人碳分解代谢物阻遏4样蛋白(CCRN4L)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Carbon Catabolite Repression 4 Like Protein