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人骨头肉瘤细胞 MG-63细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞人骨头肉瘤细胞 MG-63细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝人骨头肉瘤细胞 MG-63细胞聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人骨头肉瘤细胞 MG-63细胞
HZC048Hu 人磷脂酶B(PLB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Phospholipase B (PLB)
HZC049Hu 人磷脂酶D(PLD)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Phospholipase D (PLD)
HZC077Hu 人层黏连蛋白α4(LAMα4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Laminin Alpha 4 (LAMa4)
HZC080Hu 人层粘连蛋白β2(LAMβ2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Laminin Beta 2 (LAMb2)
HZC097Hu 人整合素α11(ITGα11)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Integrin Alpha 11 (ITGa11)
HZC169Hu 人神经秩蛋白(NRTN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neurturin (NRTN)
HZC206Hu 人组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Histone Deacetylase 1 (HDAC1)
HZC260Hu 人融合蛋白(FUS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fusion (FUS)
HZC270Hu 人7-脱氢胆固醇还原酶(DHCR7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for 7-Dehydrocholesterol Reductase (DHCR7)
HZC276Hu 人氨基酰化酶1(ACY1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aminoacylase 1 (ACY1)
HZC281Hu 人腺苷激酶(ADK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adenosine Kinase (ADK)
HZC295Hu 人无羊膜蛋白(AMN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Amnionless (AMN)
HZC304Hu 人Attractin蛋白(ATRN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Attractin (ATRN)
HZC340Hu 人胱天蛋白酶6(CASP6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Caspase 6 (CASP6)
HZC393Hu 人皮质醇稳定蛋白(CORT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cortistatin (CORT)
HZC397Hu 人羧肽酶M(CPM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Carboxypeptidase M (CPM)
HZC411Hu 人肘臀蛋白(CUBN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cubilin (CUBN)
HZC426Hu 人细胞球蛋白(CYGB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cytoglobin (CYGB)
HZC480Hu 人脂筏特征蛋白2(FLOT2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Flotillin 2 (FLOT2)
HZC520Hu 人透明质酸合酶1(HAS1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hyaluronan Synthase 1 (HAS1)
HZC551Hu 人Janus激酶1(JAK1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Janus Kinase 1 (JAK1)
HZC554Hu 人驱动蛋白2(KNS2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kinesin 2 (KNS2)
HZC559Hu 人吻素1(KISS1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kisspeptin 1 (KISS1)
HZC625Hu 人巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (MPST)
HZC692Hu 人旋光蛋白(OPTC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Opticin (OPTC)