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人成纤维肉瘤细胞 HT1080细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.人成纤维肉瘤细胞 HT1080细胞
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫人成纤维肉瘤细胞 HT1080细胞外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人成纤维肉瘤细胞 HT1080细胞
hz-E10829 人骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒 Human Crosslaps,Cr ELISAkit
hz-E10830 人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒 Human cross-linked C-telopeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISAkit
hz-E10831 人脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒 Human deoxypyridinoline,DPD ELISAkit
hz-E10832 人吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒 Human pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISAkit
hz-E10833 人骨桥素(OPN)ELISA试剂盒 Human Osteopontin,OPN ELISAkit
hz-E10834 人γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒 Human Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISAkit
hz-E10835 人P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒 Human substance P receptor,SP-R ELISAkit
hz-E10836 人环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒 Human Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISAkit
hz-E10837 人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒 Human lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISAkit
hz-E10838 人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒 Human Endothelial lipase,EL ELISAkit
hz-E10839 人横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒 Human skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISAkit
hz-E10840 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒 Human Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISAkit
hz-E10841 人25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 Human 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISAkit
hz-E10842 人白三烯B4(LTB4) ELISA试剂盒 Human Leukotriene B4,LT-B4 ELISAkit
hz-E10843 人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒 Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISAkit
hz-E10844 人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒 Human oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISAkit
hz-E10845 人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA试剂盒 Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 ELISAkit
hz-E10846 人脂联素(ADP)ELISA试剂盒 Human adiponectin,ADP ELISAkit
hz-E10847 人组胺(HIS)ELISA试剂盒 human Histamine,HIS ELISAkit
hz-E10848 人抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒 human Resistin ELISAkit
hz-E10849 人骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒 Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISAkit
hz-E10850 人骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒 Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISAkit
hz-E10851 人可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒 Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISAkit