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人成巨核细胞白血病细胞 Daudi细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.人成巨核细胞白血病细胞 Daudi细胞
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DN人成巨核细胞白血病细胞 Daudi细胞A特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人成巨核细胞白血病细胞 Daudi细胞
hz-E10922 人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)ELISA试剂盒 Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase,CYP21B ELISAkit
hz-E10923 人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA试剂盒 Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase,CYP21A ELISAkit
hz-E10924 人末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒 Human terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT ELISAkit
hz-E10925 人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒 Human indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO ELISAkit
hz-E10926 人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA试剂盒 Human serine protease,PRSS ELISAkit
hz-E10927 人脾脏酪氨酸激酶(Syk)ELISA试剂盒 Human spleen tyrosine kinase,Syk ELISAkit
hz-E10928 人丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒 Human serine/threonine protein kinase,STK ELISAkit
hz-E10929 人白介素受体相关激酶(IRAK)ELISA试剂盒 Human interleukin receptor associated kinase,IRAK ELISAkit
hz-E10930 人尿激酶(UK)ELISA试剂盒 Human urokinase,UK ELISAkit
hz-E10931 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA试剂盒 Human phosphoenolpyruvate carboxykinase,PCK ELISAkit
hz-E10932 人胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒 Human trypsin ELISAkit
hz-E10933 人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA试剂盒 Human β-site APP-Cleaving Enzyme 1,1BACE1 ELISAkit
hz-E10934 人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)ELISA试剂盒 Human Protein disulfide-isomerase precursor,PDI ELISAkit
hz-E10935 人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)ELISA试剂盒 Human protein disulfide-isomerase A3,PDIA3 ELISAkit
hz-E10936 人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒 Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISAkit
hz-E10937 人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒 Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase,PPI ELISAkit
hz-E10938 人鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)ELISA试剂盒 Human ornithine carbamoyl transferase,OCT ELISAkit
hz-E10939 人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒 Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISAkit
hz-E10940 人蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒 Human Protein Phosphatase,PP ELISAkit
hz-E10941 人硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA试剂盒 Human thioredoxin reductase,TrxR ELISAkit
hz-E10942 人白细胞弹性蛋白酶(HLE)ELISA试剂盒 Human leukocyte exastase,HLE ELISAkit
hz-E10943 人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒 Human Elastase ELISAkit
hz-E10944 人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA试剂盒 Human α-Amylase,AMS/AMY ELISAkit
hz-E10945 人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 Human alkaline phosphatase,ALP ELISAkit
hz-E10946 人天青杀素(AZU)ELISA试剂盒 Human azurocidin,AZU ELISAkit
hz-E10947 人血管紧张肽酶A(ATA)ELISA试剂盒 Human Angiotensinase A,ATA ELISAkit
hz-E10948 人胰淀粉酶(PAMY)ELISA试剂盒 Human Pancreatic Amylase,PAMY ELISAkit