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人膀胱移行细胞癌 J82细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测人膀胱移行细胞癌 J82细胞
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 3334人膀胱移行细胞癌 J82细胞2 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于人膀胱移行细胞癌 J82细胞常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
z-E11491 人白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒 Human leukotriene E4,LT-E4 ELISAkit
hz-E11492 人D二聚体(D2D)ELISA试剂盒 Human D-Dimer,D2D ELISAkit
hz-E11493 人免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 human Immunoglobulin E,IgE ELISAkit
hz-E11494 人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA试剂盒 Human Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 ELISAkit
hz-E11495 人白细胞调节素(LR)ELISA试剂盒 Human leukoregulin,LR ELISAkit
hz-E11496 人血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒 Human Thrombopoietin,TPO ELISAkit
hz-E11497 人白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒 Human Leukemia inhibitory factor,LIF ELISAkit
hz-E11498 人Salusin-α ELISA试剂盒 Human Salusin α ELISAkit
hz-E11499 人胰岛素受体底物2(IRS-2)ELISA试剂盒 human Insulin receptor substrate 2,IRS-2 ELISAkit
hz-E11500 人转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA试剂盒 Human transthyretin,TTR ELISAkit
hz-E11501 人晚期氧化蛋白产物(AOPP)ELISA试剂盒 Human advanced oxidation protein products,AOPP ELISAkit
hz-E11502 人胰岛淀粉样多肽(IAPP)ELISA试剂盒 Human islet amyloid polypeptide,IAPP ELISAkit
hz-E11503 人糖化蛋白(GSP)ELISA试剂盒 Human glycosylated serum protein,GSP ELISAkit
hz-E11504 人糖化白蛋白(GA)ELISA试剂盒 Human Glycated Albumin,GA ELISAkit
hz-E11505 人甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒 Human Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISAkit
hz-E11506 人晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒 Human advanced glycation end products,AGE