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玫瑰褐链霉菌凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形玫瑰褐链霉菌,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的玫瑰褐链霉菌细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
玫瑰褐链霉菌
HZD370Hu 人Kruppel样因子15(KLF15)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kruppel Like Factor 15 (KLF15)
HZB563Hu 人杀伤细胞免疫球蛋白样受体2DS4(KIR2DS4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Killer Cell Immunoglobulin Like Receptor 2DS4 (KIR2DS4)
HZC743Hu 人甲状旁腺素受体1(PTHR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Parathyroid Hormone Receptor 1 (PTHR1)
HZA001Hu 人激活素A(ACVA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Activin A (ACVA)
HZA002Hu 人白细胞激活黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM)
HZA004Hu 人血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Angiotensin I Converting Enzyme (ACE)
CEA005Hu 人血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Angiotensin II (AngII)
HZA006Hu 人双调蛋白(AREG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Amphiregulin (AREG)
HZA007Hu 人血管生长素(ANG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Angiogenin (ANG)
HZA008Hu 人血管生成素1(ANGPT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Angiopoietin 1 (ANGPT1)
HZA009Hu 人血管生成素2(ANGPT2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Angiopoietin 2 (ANGPT2)
HZA011Hu 人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF)
HZA112Hu 人β细胞素(βTC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Betacellulin (bTC)
HZA013Hu 人骨成型蛋白2(BMP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)
HZA014Hu 人骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)
HZA015Hu 人骨成型蛋白受体1A(BMPR1A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein Receptor 1A (BMPR1A)
HZA017Hu 人上皮性钙黏附蛋白(CDHE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cadherin, Epithelial (CDHE)
HZB575Hu 人二级淋巴组织趋化因子(SLC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Secondary Lymphoid Tissue Chemokine (SLC)
HZA019Hu 人白介素8受体α(IL8Rα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)
HZA021Hu 人睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF)
HZA024Hu 人内分泌腺来源血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)
HZA025Hu 人嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Eosinophil Chemotactic Factor (ECF)
HZA026Hu 人趋化因子C-C-基元配体3样蛋白1(CCL3L1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)
HZA027Hu 人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Erythropoietin Receptor (EPOR)
HZA028Hu 人红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Erythropoietin (EPO)
HZA029Hu 人E选择素(SELE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Selectin, Endothelium (SELE)
HZA030Hu 人凋亡相关因子(FAS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Factor Related Apoptosis (FAS)