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马克斯克鲁维酵母凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是马克斯克鲁维酵母两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染马克斯克鲁维酵母料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
马克斯克鲁维酵母
HZA068Hu 人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP)
CEA803Hu 人神经介素B(NMB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neuromedin B (NMB)
HZA886Hu 人过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPARg)
HZA820Hu 人凝血因子Ⅱ(F2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Coagulation Factor II (F2)
HZA819Hu 人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)
HZA887Hu 人丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP)
HZA861Hu 人补体成分3(C3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 3 (C3)
HZA857Hu 人克拉拉细胞蛋白16(CC16)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Clara Cell Protein 16 (CC16)
HZA890Hu 人表面活性物质关联蛋白A(SPA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Surfactant Associated Protein A (SPA)
HZA439Hu 人蛋白激酶Cε(PKCε)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protein Kinase C Epsilon (PKCe)
HZA889Hu 人肾素(REN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Renin (REN)
HZA888Hu 人补体成分4(C4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 4 (C4)
CEA796Hu 人神经肽S(NPS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neuropeptide S (NPS)
HZA600Hu 人颗粒酶B(GZMB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Granzyme B (GZMB)
HZA601Hu 人髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO)
HZA602Hu 人过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peroxisomal Biogenesis Factor 2 (PEX2)
HZA774Hu 人糖皮质激素受体α(GRα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Alpha (GRa)
HZA773Hu 人糖皮质激素受体β(GRβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Beta (GRb)
HZB058Hu 人胱天蛋白酶激活脱氧核糖核酸酶(CAD)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Caspase Activated DNase (CAD)
HZB061Hu 人蛋白二硫键异构酶(PDI)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase (PDI)
HZB062Hu 人70kDa热休克蛋白1样蛋白(HSPA1L)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)
HZB063Hu 人泛素结合酶E2A(UBE2A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A)
HZB064Hu 人凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Apoptosis Inducing Factor (AIF)
HZB066Hu 人多巴色素异构酶(DT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dopachrome Tautomerase (DCT)