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鲁氏接合酵母凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜鲁氏接合酵母
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜鲁氏接合酵母
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
鲁氏接合酵母
HZA269Hu 人磷酯酶Cγ1(PLCγ1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Phospholipase C Gamma 1 (PLCg1)
CEA697Hu 人激肽释放酶10(KLK10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kallikrein 10 (KLK10)
HZA669Hu 人激肽释放酶11(KLK11)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kallikrein 11 (KLK11)
HZA739Hu 人周期素依赖性激酶5(CDK5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5)
HZA699Hu 人环加氧酶2(PTGS2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2 (PTGS2)
HZA741Hu 人Dickkopf相关蛋白1(DKK1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 1 (DKK1)
HZA756Hu 人粘蛋白5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mucin 5 Subtype AC (MUC5AC)
CEA665Hu 人Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTXⅠ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cross Linked C-Telopeptide Of Type I Collagen (CTXI)
HZA667Hu 人葡萄糖激酶(GCK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glucokinase (GCK)
CEA946Hu 人淀粉样蛋白β1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Amyloid Beta Peptide 1-42 (Ab1-42)
HZA948Hu 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thymidine Phosphorylase (TP)
HZA672Hu 人Slit同源物2(Slit2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Slit Homolog 2 (Slit2)
HZA673Hu 人多巴胺受体D2(DRD2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dopamine Receptor D2 (DRD2)
HZA754Hu 人肌球蛋白重链1(MYH1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult (MYH1)
HZA757Hu 人表皮生长因子受体(EGFR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR)
HZA731Hu 人补体成分7(C7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 7 (C7)
HZA758Hu 人补体C3转化酶(C3c)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement C3 Convertase (C3c)
HZA760Hu 人抑制素B(INHB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Inhibin B (INHB)
HZA761Hu 人C4结合蛋白β(C4BPβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for C4 Binding Protein Beta (C4BPb)
HZA224Hu 人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11)
HZA766Hu 人解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM10)
HZA764Hu 人叉头框蛋白O1(FOXO1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Forkhead Box Protein O1 (FOXO1)
HZA762Hu 人叉头框蛋白O3(FOXO3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Forkhead Box Protein O3 (FOXO3)
HZB209Hu 人颗粒酶K(GZMK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Granzyme K (GZMK)