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两歧双歧杆菌凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完两歧双歧杆菌整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基两歧双歧杆菌区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
两歧双歧杆菌
ZA362Hu 人尾加压素2(UST2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Urotensin 2 (UST2)
HZA363Hu 人血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1)
HZA365Hu 人和肽素(CPP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Copeptin (CPP)
HZA402Hu 人基质金属蛋白酶12(MMP12)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)
HZA403Hu 人粘蛋白17(MUC17)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mucin 17 (MUC17)
HZA408Hu 人激肽释放酶9(KLK9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kallikrein 9 (KLK9)
HZA410Hu 人GATA结合蛋白3(GATA3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for GATA Binding Protein 3 (GATA3)
HZA411Hu 人钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)
HZA412Hu 人α-血红蛋白稳定蛋白(αHSP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein (aHSP)
HZA413Hu 人粘蛋白1(MUC1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mucin 1 (MUC1)
HZA414Hu 人性别决定区Y框蛋白18(SOX18)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 18 (SOX18)
HZA415Hu 人弹性蛋白微原纤维界面因子1(EMILIN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Elastin Microfibril Interface Located Protein 1 (EMILIN1)
HZA416Hu 人早期生长应答因子1(EGR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Early Growth Response Protein 1 (EGR1)
HZA421Hu 人髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)
HZA422Hu 人髓鞘关联糖蛋白(MAG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myelin Associated Glycoprotein (MAG)
HZA427Hu 人生长分化因子9(GDF9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 9 (GDF9)
HZA441Hu 人黄体激素(LH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Luteinizing Hormone (LH)
CEA447Hu 人C-肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 ELISA Kit for C-Peptide
HZA448Hu 人胰岛素(INS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin (INS)
HZA451Hu 人激肽释放酶5(KLK5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kallikrein 5 (KLK5)